厭氧菌的(de)甘油保藏方法(fa)： 

1、 厭(yan)(yan)氧(yang)甘(gan)油(you)的(de)制備： 厭(yan)(yan)氧(yang)瓶或厭(yan)(yan)氧(yang)管中(zhong)(zhong)放置一(yi)定量的(de)甘(gan)油(you)，甘(gan)油(you)的(de)量根據(ju)需要加(jia)(jia)入，不要多加(jia)(jia)，因為厭(yan)(yan)氧(yang)甘(gan)油(you)制備好(hao)以后不能反(fan)復滅菌，反(fan)復滅菌甘(gan)油(you)會變性而呈黃色(se)，且有一(yi)股芳香味道。加(jia)(jia)入終濃度(du)為0.04 %的(de) L-cysteine和 1 %的(de)5 %的(de) N2S母液(ye)。往厭(yan)(yan)氧(yang)瓶中(zhong)(zhong)通(tong)N2，通(tong)氣時間和配制培(pei)養基(ji)時時間相同。蓋上塞子和蓋子。121 ℃， 20 min 滅菌后備用(yong)。 

2、 取新鮮菌液（對數期），在(zai)通N2 的(de)情(qing)況下(xia)，用(yong)針筒(tong)和針頭往有菌液的(de)厭(yan)氧(yang)管(guan)中(zhong)加入(ru)終濃度為15-20 %的(de)厭(yan)氧(yang)甘(gan)油，再通一(yi)會N2，目的(de)是趕走在(zai)轉移甘(gan)油過程中(zhong)帶進去的(de)O2。蓋(gai)(gai)上塞子(zi)和蓋(gai)(gai)子(zi)，混勻，凍于-80 ℃。 

3、 活化(hua)：用(yong)針頭和針頭吸(xi)取一(yi)定甘油(you)保藏的(de)(de)菌(jun)(jun)液(ye)，加(jia)到(dao)培養(yang)基(ji)(ji)當(dang)中，加(jia)的(de)(de)量一(yi)般(ban)要多(duo)(duo)于1 %，因(yin)為厭氧菌(jun)(jun)的(de)(de)生物量比(bi)(bi)較小，一(yi)般(ban)2到(dao)5 %左右(you)。目測加(jia)完甘油(you)菌(jun)(jun)液(ye)的(de)(de)培養(yang)基(ji)(ji)是否渾濁，并作記(ji)錄。如果加(jia)入的(de)(de)菌(jun)(jun)液(ye)太多(duo)(duo)，造成一(yi)開(kai)始培養(yang)基(ji)(ji)就比(bi)(bi)較渾濁，會(hui)干擾我(wo)們(men)對菌(jun)(jun)是否生長的(de)(de)判斷，而且甘油(you)太多(duo)(duo)也會(hui)抑制菌(jun)(jun)的(de)(de)生長。