（一）如何避免細胞污染

細(xi)胞污(wu)(wu)染(ran)的種類可分成細(xi)菌(jun)、真菌(jun)、霉菌(jun)、病毒等(deng)。主要的污(wu)(wu)染(ran)原因(yin)為無菌(jun)操(cao)作(zuo)技(ji)術(shu)不(bu)當、操(cao)作(zuo)室(shi)環(huan)(huan)境不(bu)佳、污(wu)(wu)染(ran)的血清(qing)(qing)和污(wu)(wu)染(ran)的細(xi)胞等(deng)。嚴(yan)格無菌(jun)操(cao)作(zuo)技(ji)術(shu)、清(qing)(qing)潔(jie)的環(huan)(huan)境、與品質(zhi)良好的細(xi)胞來源和培(pei)養(yang)基(ji)配制(zhi)是(shi)減低污(wu)(wu)染(ran)的方法。

（二）支原體 （mycoplasma）污染的細胞， 對細胞培養有何影響

不能以(yi)肉(rou)眼(yan)觀察(cha)出支原體污染異(yi)狀。除極有經驗(yan)的專家(jia)外(wai)，大多數(shu)遭受支原體污染的細胞株，無法(fa)以(yi)其外(wai)觀分辨。

支(zhi)原(yuan)體污染(ran)幾乎(hu)可影響所有(you)(you)細胞的(de)生長參數(shu)，代謝及(ji)研究任一數(shu)據。故進行(xing)實驗前，必須確認細胞為 mycoplasma-free，實驗結果的(de)數(shu)據方有(you)(you)意義。

（三）培養基保存于 4 ℃ 冰箱中，顏色會偏暗紅色，且 pH 值會越來越偏堿性

培養基保存于 4 ℃ 冰箱中，培養基內的 CO₂ 會逐漸溢出，造成培養基越來越偏堿性，而培養基中的酸堿指示劑 （通常為 phenol red）的顏色也會隨堿性增加而更偏暗紅。培養基偏堿的結果，將造成細胞生長停滯或死亡。若培養基偏堿時，可以通入無菌過濾 CO_{2 ，}以調整(zheng) pH 值(zhi)。或酸(suan)堿調PH。

（四）L-谷氨酰胺在細胞培養中重要嗎？它在溶液中不穩定嗎？

L-谷(gu)氨(an)酰胺在(zai)細(xi)(xi)胞培養時是重(zhong)要的(de)。脫掉氨(an)基后(hou)，L-谷(gu)氨(an)酰胺可作為培養細(xi)(xi)胞的(de)能量來源(yuan)、參(can)與蛋白(bai)質的(de)合成(cheng)和核酸代謝。L-谷(gu)氨(an)酰胺在(zai)溶液(ye)中經過一段時間(jian)后(hou)會降(jiang)解，L-谷(gu)氨(an)酰胺的(de)降(jiang)解導(dao)致氨(an)的(de)形(xing)成(cheng)，而(er)氨(an)對(dui)于(yu)一些細(xi)(xi)胞具有毒性。

（五）什么培養基中可以省去加酚紅？培養基中丙酮酸鈉的作用是什么？

酚(fen)紅在培(pei)養基(ji)中被用(yong)(yong)來作(zuo)為 PH 值的(de)指示(shi)劑(ji)：中性時(shi)為紅色，酸性時(shi)為黃色，堿性時(shi)為紫色。由于酚(fen)紅干擾檢測(ce)，一些研究人員在做流式細(xi)胞檢測(ce)時(shi)，不使用(yong)(yong)加有(you)酚(fen)紅的(de)培(pei)養基(ji)。

丙酮酸鈉可以作為細胞培(pei)養(yang)中的替(ti)代(dai)碳源(yuan)，盡(jin)管細胞更傾向(xiang)于以葡萄(tao)糖(tang)作為碳源(yuan)，但是，如果沒有葡萄(tao)糖(tang)的話(hua)，細胞也可以代(dai)謝(xie)丙酮酸鈉。