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細胞難伺候,你真的會選培養基嗎?

更新時間:2022-03-25      點擊次數:1376
  培養基的配制
  培養(yang)基(ji)(ji)可(ke)按處(chu)方配(pei)制,也可(ke)使用按處(chu)方生產(chan)的符合規定的脫(tuo)水培養(yang)基(ji)(ji)。
  在(zai)制(zhi)(zhi)備培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)基(ji)時,應選擇質(zhi)量(liang)符(fu)(fu)合要(yao)(yao)求(qiu)的脫(tuo)(tuo)水培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)基(ji)或單(dan)獨(du)配(pei)(pei)(pei)方(fang)(fang)組分(fen)進行配(pei)(pei)(pei)制(zhi)(zhi)。脫(tuo)(tuo)水培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)基(ji)應附(fu)有處(chu)方(fang)(fang)和(he)(he)使(shi)(shi)用(yong)(yong)說(shuo)明,配(pei)(pei)(pei)制(zhi)(zhi)時應按使(shi)(shi)用(yong)(yong)說(shuo)明上(shang)的要(yao)(yao)求(qiu)操作以(yi)確保(bao)培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)基(ji)的質(zhi)量(liang)符(fu)(fu)合要(yao)(yao)求(qiu),不得使(shi)(shi)用(yong)(yong)結塊或顏色發生改變(bian)的脫(tuo)(tuo)水培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)基(ji)。脫(tuo)(tuo)水培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)基(ji)或單(dan)獨(du)配(pei)(pei)(pei)方(fang)(fang)組分(fen)應在(zai)適當的條件下(xia)儲存,如低溫、干燥(zao)和(he)(he)避光,所有的容器(qi)應密封,尤其是盛(sheng)放脫(tuo)(tuo)水培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)基(ji)的容器(qi)。商品(pin)化(hua)的成品(pin)培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)基(ji)除(chu)了(le)應附(fu)有處(chu)方(fang)(fang)和(he)(he)使(shi)(shi)用(yong)(yong)說(shuo)明外,還應注明有效期、貯存條件、適用(yong)(yong)性檢查試驗的質(zhi)控菌(jun)和(he)(he)用(yong)(yong)途。
  為(wei)保證培(pei)養基(ji)質量的穩(wen)定可靠(kao),各脫水培(pei)養基(ji)或各配方組(zu)分應準確稱(cheng)量,并(bing)要求有一定的精確度。配制(zhi)培(pei)養基(ji)常(chang)用的溶劑是純化水,特殊情況下,可能需要用去離子水和蒸餾水。應記錄各稱量物的重量和水的使用量。配制培養基所用容器和配套器具應潔凈,可用純化水沖洗玻璃器皿以消除清潔劑和外來物質的殘留。對熱敏感的培養基如糖發酵培養基其分裝容器一般應預先進行滅菌,以保證培養基的無菌性。
  脫水型(xing)培養(yang)基應(ying)(ying)*溶(rong)解于(yu)水中,再行分(fen)裝與滅菌(jun)。配制時若需要加(jia)熱助溶(rong),應(ying)(ying)注意不(bu)要過度加(jia)熱,以避免培養(yang)基顏(yan)色變深。如需要添加(jia)其它組分(fen)時,加(jia)入后應(ying)(ying)充(chong)分(fen)混勻。
  應按照(zhao)生產商提(ti)供或(huo)使用者驗證的參數進(jin)行培養(yang)(yang)基的滅菌(jun)。商品(pin)化的成品(pin)培養(yang)(yang)基必須附(fu)有所用滅菌(jun)方(fang)法的資(zi)料。培養(yang)(yang)基滅菌(jun)一般采用濕熱滅菌(jun)技術,特殊培養(yang)(yang)基可采用薄膜過濾除菌(jun)。
  培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)基(ji)(ji)若采(cai)用不適當的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)加熱和(he)(he)滅(mie)(mie)(mie)菌(jun)(jun)條件,有(you)可能引起顏色變(bian)化、透明度降低、瓊脂凝固(gu)力或pH的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)改變(bian)。因(yin)此,培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)基(ji)(ji)應(ying)采(cai)用驗(yan)(yan)(yan)證(zheng)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)滅(mie)(mie)(mie)菌(jun)(jun)程(cheng)序滅(mie)(mie)(mie)菌(jun)(jun),培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)基(ji)(ji)滅(mie)(mie)(mie)菌(jun)(jun)方法和(he)(he)條件,應(ying)通過無菌(jun)(jun)性試(shi)驗(yan)(yan)(yan)和(he)(he)促(cu)生長(chang)試(shi)驗(yan)(yan)(yan)進行驗(yan)(yan)(yan)證(zheng)。此外,對高(gao)(gao)壓滅(mie)(mie)(mie)菌(jun)(jun)器(qi)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)蒸汽循環系統也(ye)要加以驗(yan)(yan)(yan)證(zheng),以保(bao)證(zheng)在一(yi)定裝(zhuang)載方式下(xia)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)正常熱分布。溫度緩慢(man)上升的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)高(gao)(gao)壓滅(mie)(mie)(mie)菌(jun)(jun)器(qi)可能導致培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)基(ji)(ji)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)過熱,過度滅(mie)(mie)(mie)菌(jun)(jun)可能會破壞絕大多(duo)數的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)細菌(jun)(jun)和(he)(he)真菌(jun)(jun)培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)基(ji)(ji)促(cu)生長(chang)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)質量。滅(mie)(mie)(mie)菌(jun)(jun)器(qi)中培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)基(ji)(ji)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)容(rong)積和(he)(he)裝(zhuang)載方式也(ye)將影響加熱的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)速(su)度。因(yin)此,應(ying)根據(ju)滅(mie)(mie)(mie)菌(jun)(jun)培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)基(ji)(ji)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)特性,進行全(quan)面的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)滅(mie)(mie)(mie)菌(jun)(jun)程(cheng)序驗(yan)(yan)(yan)證(zheng)。,
  應確定每批(pi)培(pei)養(yang)基滅菌后的(de)pH(冷卻(que)至室溫25℃測定)。若培(pei)養(yang)基處方中列(lie)出pH的(de)范圍,除非經驗證表明培(pei)養(yang)基的(de)pH允許的(de)變化范圍很寬,否則,pH的(de)范圍不能(neng)超(chao)過規定的(de)±0.2。
  制(zhi)成(cheng)(cheng)(cheng)平板或分裝(zhuang)于試管的培養(yang)基應進(jin)行下(xia)列檢(jian)查:容器和(he)蓋(gai)子不(bu)(bu)得(de)破(po)裂,裝(zhuang)量應相(xiang)同,盡量避免形成(cheng)(cheng)(cheng)氣泡,固體培養(yang)基表(biao)面(mian)不(bu)(bu)得(de)產生裂縫或漣漪(yi),在(zai)冷藏(zang)溫度(du)下(xia)不(bu)(bu)得(de)形成(cheng)(cheng)(cheng)結晶,不(bu)(bu)得(de)污(wu)染微生物(wu)等(deng)。應檢(jian)查和(he)記(ji)錄批數量、有(you)效(xiao)期(qi)及培養(yang)基的無(wu)菌檢(jian)查。
  培(pei)養基的(de)貯存
  自配的(de)培(pei)(pei)養(yang)(yang)基應標記名(ming)(ming)稱(cheng)、批號、配制日期等(deng)信息,并在(zai)已(yi)驗證的(de)條件下貯藏(zang)。商品(pin)化(hua)的(de)成(cheng)品(pin)培(pei)(pei)養(yang)(yang)基標簽上應標有名(ming)(ming)稱(cheng)、批號、生產(chan)日期、失(shi)效期及培(pei)(pei)養(yang)(yang)基的(de)有關特性,生產(chan)商和(he)使(shi)用者應根據培(pei)(pei)養(yang)(yang)基使(shi)用說明書(shu)上的(de)要求進(jin)行(xing)保存,所采(cai)用的(de)保藏(zang)和(he)運輸條件應使(shi)成(cheng)品(pin)培(pei)(pei)養(yang)(yang)基低(di)限度的失去水分并提供機械保護。
  培(pei)養基滅菌后若儲藏在高壓(ya)滅菌器中,質量(liang)可能(neng)會受影(ying)響,一般不(bu)(bu)提倡這種存放法。瓊脂培(pei)養基不(bu)(bu)得在0℃或0℃以(yi)下存放,因為冷(leng)凍(dong)可能(neng)破壞凝膠特性。
  培養基(ji)應避(bi)光保(bao)(bao)存,若(ruo)要長(chang)(chang)期保(bao)(bao)存,應置(zhi)于(yu)密閉(bi)容器中以防止水分(fen)流失(shi)。瓊(qiong)脂平板最好現配現用,如置(zhi)冰(bing)箱保(bao)(bao)存,一般不超過(guo)一周,且應密閉(bi)包(bao)裝,若(ruo)延長(chang)(chang)保(bao)(bao)存,保(bao)(bao)存期需經驗證確定。
  固體培(pei)(pei)養(yang)基(ji)(ji)滅菌后的(de)(de)(de)再(zai)融化(hua)只允許一次(ci),以避免(mian)因過度受熱造成(cheng)培(pei)(pei)養(yang)基(ji)(ji)質(zhi)量下(xia)降(jiang)或微(wei)生物污(wu)染(ran)。培(pei)(pei)養(yang)基(ji)(ji)的(de)(de)(de)再(zai)融化(hua)一般(ban)采用的(de)(de)(de)水浴(yu)加熱或流通(tong)蒸汽。若使用微(wei)波爐,應避免(mian)培(pei)(pei)養(yang)基(ji)(ji)過度受熱及水分的(de)(de)(de)蒸發(fa),更(geng)要注意(yi)安(an)全。融化(hua)的(de)(de)(de)培(pei)(pei)養(yang)基(ji)(ji)應置于45~50℃的(de)(de)(de)水浴(yu)中(zhong),不(bu)得(de)超(chao)過8小時。傾注培(pei)(pei)養(yang)基(ji)(ji)時,應擦干培(pei)(pei)養(yang)基(ji)(ji)容(rong)器外表面的(de)(de)(de)水分,避免(mian)容(rong)器外壁的(de)(de)(de)水滴(di)進(jin)入培(pei)(pei)養(yang)基(ji)(ji)中(zhong)造成(cheng)污(wu)染(ran)。
  使用過的(de)培(pei)(pei)養(yang)基(包括失效的(de)培(pei)(pei)養(yang)基)應按(an)照國(guo)家污染(ran)廢物(wu)處理相關規定(ding)進行處理。
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