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膀胱癌細胞系收(shou)到細(xi)胞(bao)后，取出培養(yang)瓶在(zai)倒置顯(xian)微鏡下(xia)觀(guan)察細(xi)胞(bao)生長(chang)情況。
（一）如果(guo)細(xi)胞未(wei)長滿(man)，用75%酒精噴灑整個瓶(ping)消毒后放(fang)到超菌臺內(nei)，嚴格(ge)無(wu)菌操作，打開細(xi)胞培(pei)養(yang)瓶(ping)，吸出培(pei)養(yang)液(ye)，僅留下10ml培(pei)養(yang)液(ye)在瓶(ping)內(nei)繼續培(pei)養(yang)。
(二)如果細胞已長滿(man)，即(ji)可進行傳代培(pei)養。步驟如具體(ti)下(xia)：
1. 棄去培養液，用PBS（不(bu)含鈣，鎂(mei)離(li)子）洗1-2次。
膀胱癌細胞系
2. 加1ml消(xiao)化(hua)液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培(pei)養(yang)(yang)瓶中，倒轉放于37度培(pei)養(yang)(yang)箱(xiang)1-3分鐘預熱(re)，然后又將培(pei)養(yang)(yang)瓶倒轉大(da)約30秒后，在倒置顯微(wei)鏡(jing)下觀(guan)察細(xi)胞(bao)消(xiao)化(hua)情況，若細(xi)胞(bao)大(da)部分變圓分散，輕敲幾下培(pei)養(yang)(yang)培(pei)養(yang)(yang)瓶，細(xi)胞(bao)隨即脫落下來(lai)。
3. 加入6-8ml*培養(yang)基(ji)，吸出(chu)，分到新的(de)培養(yang)瓶中(zhong)。1:3~1:6傳代；2~3天1次。
注意：傳(chuan)代后一半用(yong)(yong)我們(men)(men)的培養基，一半用(yong)(yong)你們(men)(men)的，以免細(xi)胞不適應而造
成生長不好。
凍存方法(fa)： 凍存液：基礎培(pei)養基 5%DMSO 20%FBS
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