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HPT-8 人飼養層上皮細胞.
培養條件(jian):*培養基: DMEM高糖90%+10%胎牛血清(qing)
培養條件:37.0C carbon dioxide(CO2),5%
HPT-8 人飼養層上皮細胞.
傳代方法:
收到細胞后,取出培養瓶在倒(dao)置顯微鏡下觀察細胞生(sheng)長(chang)情況。
(一)如果(guo)細胞(bao)未長滿(man),用75%酒(jiu)精噴灑整(zheng)個瓶(ping)消(xiao)毒后放到超菌臺內,嚴格無菌操作,打開細胞(bao)培養(yang)瓶(ping),吸出培養(yang)液,僅留下10ml培養(yang)液在瓶(ping)內繼續培養(yang)。
(二)如果細胞已(yi)長滿,即(ji)可進(jin)行傳代培養。具體步驟如下:
1. 棄去培養液(ye),用PBS(不含鈣,鎂離子)洗1-2次。
2. 加1ml消化液(ye)(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yang)瓶中,倒轉放于37度培養(yang)箱1-3分鐘預(yu)熱,然后(hou)又將(jiang)培養(yang)瓶倒轉大約(yue)30秒后(hou),在倒置顯微(wei)鏡下(xia)觀察細(xi)胞消化情況,若細(xi)胞大部分變圓分散,輕(qing)敲幾(ji)下(xia)培養(yang)培養(yang)瓶,細(xi)胞隨(sui)即脫落(luo)下(xia)來。
3. 加(jia)入(ru)6-8ml*培養基(ji),吸出,分到新(xin)的培養瓶(ping)中。一傳二(er)。
注意:傳(chuan)代后一(yi)(yi)半用我們的(de)培(pei)養基,一(yi)(yi)半用你們的(de),以免細胞不適應而造
成生長不好。
HPT-8 人飼養層上皮細胞.
凍(dong)(dong)存方法: 凍(dong)(dong)存液(ye):95%*培養液(ye),5%DMSO
儲存:液氮儲存
HPT-8 人飼養層上皮細胞
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