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HaCaT 人永生化表皮細胞.
細(xi)胞株名稱(cheng):Hacat 人永(yong)生(sheng)化角質細(xi)胞
種屬:人
性別:
組織來源:皮膚
生長特性:貼壁生長
形態特(te)征:上皮細胞樣
*培(pei)養基: DMEM(內含2mM L-glutamine)+15%胎牛血清
HaCaT 人永生化表皮細胞.
培養條(tiao)件:37.0C carbon dioxide(CO2),5%
收到細胞后,取出培(pei)養瓶在倒置顯微鏡下觀(guan)察(cha)細胞生長情(qing)況(kuang)。
(一)如果(guo)細胞未長滿,用75%酒精噴灑整個瓶(ping)消毒后放到超菌臺(tai)內(nei),嚴格無菌操(cao)作(zuo),打開細胞培養(yang)瓶(ping),吸出(chu)培養(yang)液,僅留下10ml培養(yang)液在瓶(ping)內(nei)繼續培養(yang)。
(二(er))如(ru)(ru)果細胞已長滿,即可進行傳代培養。具體步驟如(ru)(ru)下:
1. 棄去培養(yang)液,用PBS(不含鈣(gai),鎂離(li)子)洗1-2次。
2. 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培(pei)養瓶(ping)中,倒轉(zhuan)放于37度培(pei)養箱(xiang)1-3分鐘預熱,然后又將培(pei)養瓶(ping)倒轉(zhuan)大約30秒后,在(zai)倒置顯微鏡下(xia)觀察細胞(bao)消化情況(kuang),若(ruo)細胞(bao)大部分變(bian)圓分散,輕敲(qiao)幾下(xia)培(pei)養培(pei)養瓶(ping),細胞(bao)隨即(ji)脫落下(xia)來(lai)。
3. 加入6-8ml*培(pei)養基(ji),吸出,分到(dao)新的培(pei)養瓶中。一(yi)傳二。
注(zhu)意(yi):傳(chuan)代后一半用我(wo)們(men)的培養基,一半用你們(men)的,以免細胞不適應而(er)造
成生長不好。
HaCaT 人永生化表皮細胞.
凍存液:95%*培養液,5%DMSO
儲存:液氮儲存
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