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HSF 人皮膚成纖維樣細胞.
HSF 人皮膚成纖(xian)維樣細胞
種屬:人
性別:男
組織來源(yuan):正常人(ren) 皮(pi)膚
生長特性:貼壁生長
形態特征:成纖維樣
染色體:2n=46
HSF 人皮膚成纖維樣細胞
培(pei)養條件:
*培養基(ji): DMEM85%(內(nei)含2mM Glutamin)+15%胎牛血(xue)清(qing)
培養(yang)條件:37.0C carbon dioxide(CO2),5%
HSF 人皮膚成纖維樣細胞.
傳(chuan)代方法:
收到細(xi)胞后,取出(chu)培養瓶(ping)在倒(dao)置顯微鏡下觀察細(xi)胞生(sheng)長情況。
(一)如果(guo)細胞未長滿,用75%酒精噴(pen)灑(sa)整個瓶消毒后(hou)放(fang)到超菌(jun)臺內,嚴格無菌(jun)操作,打開細胞培(pei)養(yang)(yang)瓶,吸出培(pei)養(yang)(yang)液(ye),僅(jin)留(liu)下10ml培(pei)養(yang)(yang)液(ye)在瓶內繼續培(pei)養(yang)(yang)。
(二(er))如果細胞已(yi)長滿(man),即(ji)可(ke)進行傳代培養。具體(ti)步驟如下:
1. 棄去培養液(ye),用PBS(不含(han)鈣,鎂離子)洗1-2次(ci)。
2. 加1ml消(xiao)化(hua)液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培(pei)養(yang)(yang)瓶中(zhong),倒(dao)(dao)轉(zhuan)放于37度培(pei)養(yang)(yang)箱1-3分鐘預熱,然(ran)后又將培(pei)養(yang)(yang)瓶倒(dao)(dao)轉(zhuan)大約30秒后,在倒(dao)(dao)置顯(xian)微鏡下觀察(cha)細胞(bao)(bao)消(xiao)化(hua)情況,若細胞(bao)(bao)大部分變圓分散(san),輕敲(qiao)幾下培(pei)養(yang)(yang)培(pei)養(yang)(yang)瓶,細胞(bao)(bao)隨即脫落(luo)下來。
3. 加入6-8ml*培養(yang)基,吸出,分到(dao)新的培養(yang)瓶中。一傳(chuan)二。
注意:傳代后一半(ban)用我們的培養基,一半(ban)用你(ni)們的,以免細胞不(bu)適應而造
成生長不好。
HSF 人皮膚成纖維樣細胞.
凍(dong)存方法:
凍存液:95%*培養(yang)液,5%DMSO
儲存:液氮儲存
HSF 人皮膚成纖維樣細胞
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