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LX-2 人肝星形細胞.
細胞系特征 | ||
培(pei)養(yang)條(tiao)件: | *培養基:MEM(高糖)+10% NBS 培(pei)養條(tiao)件:37.0C carbon dioxide(CO2),5% | |
傳(chuan)代方法: | LX-2 人肝星形細胞. 收到細胞后,取(qu)出(chu)培養瓶(ping)在倒(dao)置顯微鏡下觀察細胞生長情況。 (一)如果細(xi)(xi)胞(bao)未長(chang)滿,用75%酒(jiu)精噴灑整個瓶消(xiao)毒后放到超菌(jun)臺內(nei),嚴格無菌(jun)操作,打開細(xi)(xi)胞(bao)培(pei)(pei)養(yang)瓶,吸出(chu)培(pei)(pei)養(yang)液,僅留下(xia)10ml培(pei)(pei)養(yang)液在瓶內(nei)繼續培(pei)(pei)養(yang)。 (二)如果細胞已長滿,即可進行傳代培養。具體步驟如下: 1. 棄去(qu)培(pei)養液,用PBS(不含(han)鈣,鎂離子)洗1-2次。 2. 加1ml消化(hua)液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于(yu)培養瓶中,倒(dao)轉放于(yu)37度培養箱(xiang)1-3分鐘預熱,然后又(you)將培養瓶倒(dao)轉大(da)約30秒后,在(zai)倒(dao)置顯微鏡(jing)下(xia)觀察細胞(bao)(bao)消化(hua)情況,若細胞(bao)(bao)大(da)部分變圓分散,輕敲幾下(xia)培養培養瓶,細胞(bao)(bao)隨即脫(tuo)落下(xia)來。 3. 加入6-8ml*培(pei)(pei)養基,吸出(chu),分到新的培(pei)(pei)養瓶中(zhong)。一傳二(er)。 注意:傳代后一半用(yong)(yong)我們的培養基,一半用(yong)(yong)你們的,以(yi)免細(xi)胞(bao)不適應而造(zao) 成生長不好。 ----------------------------- | |
凍(dong)存方法(fa): | 凍存液:95%*培(pei)養液,5%DMSO 儲存:液(ye)氮(dan)儲存 |
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