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GP2-293 人胚腎上皮包裝細胞
收到細胞(bao)(bao)后,取(qu)出培養瓶(ping)在倒置顯(xian)微(wei)鏡下觀(guan)察細胞(bao)(bao)生長情況。
(一)如果(guo)細胞(bao)未長滿,用75%酒精噴灑(sa)整(zheng)個瓶(ping)消(xiao)毒(du)后(hou)放到超菌(jun)臺內,嚴格無菌(jun)操(cao)作(zuo),打開(kai)細胞(bao)培養(yang)(yang)瓶(ping),吸出培養(yang)(yang)液(ye),僅(jin)留(liu)下10ml培養(yang)(yang)液(ye)在瓶(ping)內繼續培養(yang)(yang)。
(二)如果細胞已長滿,即可進行傳(chuan)代培養(yang)。具體步驟(zou)如下:
1. 棄(qi)去培養液,用(yong)PBS(不含鈣(gai),鎂(mei)離子)洗1-2次。
GP2-293 人胚腎上皮包裝細胞
2. 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培(pei)(pei)養(yang)(yang)瓶中,倒轉(zhuan)放于37度培(pei)(pei)養(yang)(yang)箱1-3分鐘預熱,然后又將培(pei)(pei)養(yang)(yang)瓶倒轉(zhuan)大(da)約30秒(miao)后,在倒置顯(xian)微鏡(jing)下觀察細(xi)胞消化情況,若細(xi)胞大(da)部(bu)分變圓分散(san),輕(qing)敲幾下培(pei)(pei)養(yang)(yang)培(pei)(pei)養(yang)(yang)瓶,細(xi)胞隨即脫落下來。
3. 加入6-8ml*培養(yang)基,吸(xi)出(chu),分到新的(de)培養(yang)瓶(ping)中。一傳(chuan)二。
GP2-293
注意:傳代后(hou)一瓶(ping)用我們的(de)培(pei)養(yang)基,一瓶用(yong)你們的培養基(ji),以免細胞不適應而造成生長不好(hao)。
GP2-293
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