簡(jian)要(yao)描述:HMC 人腎小球系膜細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao),ATCC 細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)|細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)系|細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)株(zhu)|細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao),細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)庫管理規范,提供(gong)的(de)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)株(zhu)背景(jing)清(qing)楚,提供(gong)參(can)考文獻和培養條件(jian)
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HMC 人腎小球系膜細胞
培養(yang)基和添加(jia)劑
RPMI 1640+10%胎牛(niu)血清或新生(sheng)牛(niu)血清
HMC 人腎小球系膜細胞
傳代方法:
收到細胞后(hou),取出培養瓶在倒置顯微鏡下觀察(cha)細胞生長(chang)情況(kuang)。
(一)如果細(xi)胞未長滿,用75%酒精(jing)噴灑整(zheng)個(ge)瓶(ping)(ping)消(xiao)毒后放到超菌臺(tai)內,嚴格無菌操(cao)作,打(da)開細(xi)胞培(pei)養瓶(ping)(ping),吸出培(pei)養液,僅留下10ml培(pei)養液在瓶(ping)(ping)內繼續培(pei)養。
(二)如果細(xi)胞已長滿,即可進行傳代(dai)培養。具體步驟(zou)如下:
1. 棄去培養液,用PBS(不含(han)鈣(gai),鎂離子)洗1-2次。
2. 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培(pei)養(yang)瓶(ping)中,倒轉(zhuan)放于37度(du)培(pei)養(yang)箱1-3分(fen)鐘預(yu)熱,然(ran)后又(you)將培(pei)養(yang)瓶(ping)倒轉(zhuan)大約30秒后,在倒置顯微鏡(jing)下(xia)觀察(cha)細(xi)胞(bao)消化情(qing)況(kuang),若(ruo)細(xi)胞(bao)大部分(fen)變圓分(fen)散,輕敲幾(ji)下(xia)培(pei)養(yang)培(pei)養(yang)瓶(ping),細(xi)胞(bao)隨即脫(tuo)落(luo)下(xia)來(lai)。
3. 加入6-8ml*培養基,吸出,分到新的培養瓶中。1:3~1:6傳(chuan)代;2~3天(tian)1次(ci)。
。
注意:傳代后(hou)一(yi)半(ban)(ban)用(yong)我們的培養(yang)基,一(yi)半(ban)(ban)用(yong)你(ni)們的,以免細胞不(bu)適應而造
成生長不(bu)好。
HMC
凍存方法: 凍存液:基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
儲(chu)存:液氮儲(chu)存
HMC
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