簡要描述(shu):L-02 人肝細(xi)(xi)胞(bao)(bao).,ATCC 細(xi)(xi)胞(bao)(bao)|細(xi)(xi)胞(bao)(bao)系(xi)|細(xi)(xi)胞(bao)(bao)株|腫瘤細(xi)(xi)胞(bao)(bao)|細(xi)(xi)胞(bao)(bao)|貼壁細(xi)(xi)胞(bao)(bao)|懸浮細(xi)(xi)胞(bao)(bao)|;細(xi)(xi)胞(bao)(bao)庫管理規范,提供(gong)的細(xi)(xi)胞(bao)(bao)株背景清楚,提供(gong)參考文獻和培養條件!
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L-02 人肝細胞.
培養條件:*培養基(ji): DMEM高(gao)糖90%+10%胎牛血清
培(pei)養條件:37.0C carbon dioxide(CO2),5%
L-02 人肝細胞.
傳代方法:
收到細胞(bao)后,取出培養瓶(ping)在倒置顯(xian)微鏡下觀察細胞(bao)生長情況。
(一(yi))如果細(xi)胞未長(chang)滿,用75%酒精噴灑整個瓶(ping)消毒后(hou)放到超菌(jun)(jun)臺內(nei),嚴(yan)格無菌(jun)(jun)操作,打開細(xi)胞培(pei)(pei)(pei)養(yang)瓶(ping),吸(xi)出培(pei)(pei)(pei)養(yang)液,僅留下10ml培(pei)(pei)(pei)養(yang)液在(zai)瓶(ping)內(nei)繼續培(pei)(pei)(pei)養(yang)。
(二)如(ru)(ru)果細胞已(yi)長(chang)滿,即可進行傳代(dai)培養。具體步驟如(ru)(ru)下:
1. 棄去(qu)培養液,用PBS(不含(han)鈣,鎂離(li)子)洗1-2次。
2. 加1ml消化液(ye)(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)瓶(ping)中(zhong),倒(dao)(dao)轉放(fang)于37度培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)箱(xiang)1-3分(fen)鐘預熱(re),然后(hou)(hou)又將培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)瓶(ping)倒(dao)(dao)轉大(da)約30秒后(hou)(hou),在(zai)倒(dao)(dao)置顯(xian)微鏡下(xia)觀察細胞消化情(qing)況(kuang),若細胞大(da)部分(fen)變(bian)圓分(fen)散,輕(qing)敲幾下(xia)培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)瓶(ping),細胞隨即脫(tuo)落下(xia)來。
3. 加(jia)入6-8ml*培(pei)養(yang)基(ji),吸出,分到新(xin)的培(pei)養(yang)瓶中。一(yi)傳二。
注意:傳(chuan)代后一(yi)半用我們(men)(men)的培養基,一(yi)半用你們(men)(men)的,以免細胞(bao)不(bu)適應而造
成生長不好。
凍存方(fang)法(fa): 凍存液:95%*培養(yang)液,5%DMSO
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