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培養條件(jian)：
*培養基(ji)：DMEM高糖培養基(ji)90%；胎牛血清10%。
培(pei)養條件：37.0C carbon dioxide(CO2),5%
收到細胞(bao)后(hou)，取出培(pei)養瓶在倒置顯微鏡下觀察細胞(bao)生長情況。
（一）如果(guo)細(xi)胞未長滿，用75%酒精(jing)噴(pen)灑整個瓶消毒(du)后(hou)放到超菌臺內，嚴格無菌操作，打開細(xi)胞培養(yang)(yang)瓶，吸出(chu)培養(yang)(yang)液(ye)，僅留(liu)下10ml培養(yang)(yang)液(ye)在瓶內繼續培養(yang)(yang)。
(二)如果(guo)細胞已長滿，即(ji)可進行傳(chuan)代培養(yang)。具(ju)體步驟(zou)如下：
1. 棄去培養液，用PBS（不(bu)含鈣，鎂離子）洗1-2次(ci)。
2. 加(jia)1ml消化(hua)液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培(pei)養(yang)瓶(ping)中，倒(dao)轉放于37度培(pei)養(yang)箱1-3分鐘(zhong)預熱，然后又(you)將(jiang)培(pei)養(yang)瓶(ping)倒(dao)轉大約30秒后，在倒(dao)置(zhi)顯(xian)微鏡下觀察(cha)細胞(bao)(bao)消化(hua)情(qing)況(kuang)，若細胞(bao)(bao)大部分變圓分散(san)，輕(qing)敲幾(ji)下培(pei)養(yang)培(pei)養(yang)瓶(ping)，細胞(bao)(bao)隨即脫(tuo)落下來。
3. 加入6-8ml*培(pei)養(yang)基，吸出，分到新的培(pei)養(yang)瓶中(zhong)。1:3~1:6傳代；2~3天1次。
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注意(yi)：傳代(dai)后一(yi)半(ban)用(yong)(yong)我們的培養基，一(yi)半(ban)用(yong)(yong)你們的，以免細胞不適(shi)應而造
成(cheng)生長(chang)不好。
凍存(cun)方(fang)法： 凍存(cun)液：基(ji)礎培養基(ji)+5%DMSO+20%FBS
儲存(cun)(cun)：液氮儲存(cun)(cun)
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