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HES 人胚皮膚成纖維樣細胞
培(pei)養條件(jian)：*培(pei)養基： DMEM高糖+10%胎牛血清
HES 人胚皮膚成纖維樣細胞
培養(yang)條件：37.0C carbon dioxide(CO2),5%
傳代方法：
收到(dao)細(xi)胞(bao)后，取出培養瓶在倒置顯(xian)微鏡下(xia)觀察細(xi)胞(bao)生(sheng)長情況。
（一）如(ru)果細(xi)胞未長滿，用75%酒精噴灑整個瓶消毒后(hou)放到(dao)超(chao)菌臺內，嚴格無菌操作，打開細(xi)胞培(pei)養(yang)瓶，吸出(chu)培(pei)養(yang)液(ye)，僅留下10ml培(pei)養(yang)液(ye)在瓶內繼續培(pei)養(yang)。
(二(er))如果(guo)細胞已長(chang)滿，即可進(jin)行傳代培(pei)養。具(ju)體(ti)步(bu)驟(zou)如下：
1. 棄(qi)去(qu)培養液(ye)，用PBS（不含鈣，鎂離子）洗1-2次。
2. 加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培(pei)(pei)養(yang)瓶(ping)中，倒(dao)(dao)轉(zhuan)放于37度培(pei)(pei)養(yang)箱(xiang)1-3分(fen)(fen)鐘(zhong)預熱，然后又將培(pei)(pei)養(yang)瓶(ping)倒(dao)(dao)轉(zhuan)大約(yue)30秒后，在倒(dao)(dao)置顯微(wei)鏡下觀(guan)察細(xi)胞消化情況，若細(xi)胞大部分(fen)(fen)變圓分(fen)(fen)散，輕敲幾下培(pei)(pei)養(yang)培(pei)(pei)養(yang)瓶(ping)，細(xi)胞隨即(ji)脫落下來。
3. 加入6-8ml*培養基，吸(xi)出，分到新(xin)的培養瓶中(zhong)。一傳二。
注意：傳(chuan)代后(hou)一(yi)半(ban)用我們的培養(yang)基(ji)，一(yi)半(ban)用你們的，以(yi)免(mian)細胞不適(shi)應而(er)造
成生長不好。
HES
凍存(cun)方(fang)法： 凍存(cun)液(ye)：95%*培(pei)養液(ye)，5%DMSO
儲存：液氮儲存
凍存方法： 凍存液：95%*培養液，5%DMSO
儲存：液氮儲存
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