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EC-304 人血管內皮細胞
培養條件:
*培養基: RPMI 1640+10%胎(tai)牛血清
培養條件:37.0C carbon dioxide(CO2),5%
EC-304 人血管內皮細胞
傳代方法:
收(shou)到細胞(bao)后(hou),取(qu)出培養瓶在倒置顯微鏡下觀察細胞(bao)生長(chang)情況。
(一)如果細胞未長(chang)滿,用(yong)75%酒精(jing)噴灑整個瓶(ping)消毒后放(fang)到超菌(jun)臺內,嚴格無(wu)菌(jun)操作,打開(kai)細胞培(pei)養瓶(ping),吸(xi)出(chu)培(pei)養液(ye),僅留下10ml培(pei)養液(ye)在瓶(ping)內繼續培(pei)養。
(二)如(ru)果細胞已長滿,即可進行傳(chuan)代培養。具體步驟如(ru)下:
1. 棄(qi)去培養液,用PBS(不含(han)鈣(gai),鎂離子(zi))洗1-2次(ci)。
2. 加1ml消化(hua)液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于(yu)培(pei)養(yang)(yang)瓶中,倒(dao)轉放于(yu)37度培(pei)養(yang)(yang)箱1-3分鐘(zhong)預(yu)熱,然(ran)后又將(jiang)培(pei)養(yang)(yang)瓶倒(dao)轉大約30秒后,在倒(dao)置顯微鏡下觀察細(xi)胞(bao)(bao)消化(hua)情(qing)況(kuang),若細(xi)胞(bao)(bao)大部分變圓分散,輕(qing)敲幾下培(pei)養(yang)(yang)培(pei)養(yang)(yang)瓶,細(xi)胞(bao)(bao)隨即脫(tuo)落下來。
3. 加入(ru)6-8ml*培養基,吸出,分到新的(de)培養瓶中。一(yi)傳二(er)。
注意:傳(chuan)代后一半(ban)用我(wo)們(men)的培養基,一半(ban)用你們(men)的,以免細胞不適應而(er)造
成生長不好。
EC-304
凍存方法: 凍存液(ye):95%*培養液(ye),5%DMSO
儲存:液氮儲存
EC-304
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