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HaCaT細胞， 人永生化表皮細胞
細胞株名稱：HaCaT細胞， 人永生化表皮細胞
種(zhong)屬：人
性別：
組織來源：皮(pi)膚
生(sheng)長特性：貼壁生(sheng)長
形態特征(zheng)：上皮細(xi)胞樣
*培養基： DMEM（內含2mM L-glutamine）+15%胎牛血清
培養(yang)條件：37.0C carbon dioxide(CO2),5%
收到(dao)細(xi)胞后，取出培養瓶(ping)在(zai)倒(dao)置顯微(wei)鏡(jing)下(xia)觀察細(xi)胞生長(chang)情(qing)況(kuang)。
（一）如(ru)果(guo)細胞未(wei)長(chang)滿，用75%酒精(jing)噴(pen)灑整(zheng)個瓶(ping)消毒后放到(dao)超菌臺(tai)內，嚴(yan)格無菌操作，打開細胞培(pei)(pei)養(yang)(yang)瓶(ping)，吸出培(pei)(pei)養(yang)(yang)液，僅留下10ml培(pei)(pei)養(yang)(yang)液在瓶(ping)內繼(ji)續(xu)培(pei)(pei)養(yang)(yang)。
(二(er))如果細胞已長(chang)滿，即(ji)可進行(xing)傳(chuan)代(dai)培養。具體步驟如下(xia)：
1. 棄去培養(yang)液，用PBS（不(bu)含(han)鈣，鎂(mei)離子）洗1-2次。
2. 加(jia)1ml消化液(ye)（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于(yu)培(pei)養瓶(ping)中，倒(dao)轉放(fang)于(yu)37度培(pei)養箱1-3分鐘預熱，然后又將培(pei)養瓶(ping)倒(dao)轉大約(yue)30秒后，在倒(dao)置顯(xian)微鏡(jing)下(xia)觀察細胞消化情況，若(ruo)細胞大部分變圓分散，輕敲幾下(xia)培(pei)養培(pei)養瓶(ping)，細胞隨即脫落(luo)下(xia)來。
3. 加入6-8ml*培養基，吸(xi)出，分到新(xin)的培養瓶中。一(yi)傳(chuan)二。
注意(yi)：傳(chuan)代后一半(ban)用我們的培養基，一半(ban)用你(ni)們的，以免細胞不(bu)適應而造(zao)
成生長(chang)不好。
凍存(cun)液(ye)：95%*培養液(ye)，5%DMSO
儲存(cun)(cun)：液氮儲存(cun)(cun)
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