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HSF細胞, 人皮膚成纖維樣細胞
HSF細胞, 人皮膚成纖維樣細胞
種(zhong)屬:人
性(xing)別:男
組織來源:正常(chang)人(ren) 皮膚
生(sheng)長(chang)特性(xing):貼壁生(sheng)長(chang)
形(xing)態特征:成(cheng)纖維(wei)樣
染色體:2n=46
培養條件:
*培養基: DMEM85%(內含2mM Glutamin)+15%胎牛血清
培養條件:37.0C carbon dioxide(CO2),5%
傳(chuan)代方法(fa):
收到細胞后,取出(chu)培養瓶在倒置顯微鏡下觀(guan)察細胞生(sheng)長情況。
(一(yi))如果(guo)細胞未長滿,用75%酒精噴灑整(zheng)個瓶(ping)消毒后(hou)放到超菌臺內(nei),嚴格無菌操作,打開細胞培養(yang)瓶(ping),吸出培養(yang)液,僅留下10ml培養(yang)液在瓶(ping)內(nei)繼續培養(yang)。
(二(er))如(ru)果細胞已長滿(man),即(ji)可(ke)進(jin)行傳代培養。具體步(bu)驟如(ru)下:
1. 棄去培(pei)養液,用PBS(不(bu)含(han)鈣,鎂離子(zi))洗1-2次。
2. 加(jia)1ml消(xiao)化液(ye)(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yang)(yang)瓶中,倒(dao)轉放于37度培養(yang)(yang)箱1-3分(fen)鐘預熱,然后又(you)將培養(yang)(yang)瓶倒(dao)轉大約30秒后,在倒(dao)置(zhi)顯微(wei)鏡(jing)下(xia)觀察細(xi)胞消(xiao)化情況,若細(xi)胞大部分(fen)變圓(yuan)分(fen)散,輕敲幾下(xia)培養(yang)(yang)培養(yang)(yang)瓶,細(xi)胞隨即脫落下(xia)來。
3. 加(jia)入6-8ml*培養基,吸出,分(fen)到新(xin)的培養瓶中。一傳二。
注意(yi):傳代后一(yi)半(ban)用我們的培養基,一(yi)半(ban)用你們的,以(yi)免細胞不適(shi)應而造
成生長不好(hao)。
凍(dong)存(cun)方(fang)法:
凍(dong)存液(ye):95%*培養液(ye),5%DMSO
儲(chu)存:液氮儲(chu)存
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