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H322細胞, 人非小細胞肺癌細胞
培養條件:
*培(pei)養基:DMEM高糖(tang)培(pei)養基90%;胎牛血清10%。
培養條件:37.0C carbon dioxide(CO2),5%
H322細胞, 人非小細胞肺癌細胞
傳代方法:
收到細(xi)胞后(hou),取出(chu)培養瓶在倒置(zhi)顯微(wei)鏡下觀察細(xi)胞生長情況(kuang)。
(一)如(ru)果細胞(bao)未長滿,用75%酒精噴灑(sa)整個瓶(ping)消毒(du)后放到超菌臺(tai)內,嚴格無菌操作,打開細胞(bao)培(pei)養瓶(ping),吸出培(pei)養液,僅留下10ml培(pei)養液在瓶(ping)內繼續培(pei)養。
(二(er))如果(guo)細胞已(yi)長滿,即可(ke)進(jin)行傳(chuan)代(dai)培養。具體步驟(zou)如下:
1. 棄去培養液,用PBS(不含鈣,鎂離子(zi))洗1-2次。
2. 加1ml消(xiao)化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培(pei)養(yang)瓶中,倒轉放(fang)于37度培(pei)養(yang)箱(xiang)1-3分(fen)鐘預熱,然后(hou)又將(jiang)培(pei)養(yang)瓶倒轉大約30秒后(hou),在倒置顯微(wei)鏡下觀察細(xi)胞消(xiao)化情況,若細(xi)胞大部分(fen)變圓分(fen)散,輕敲(qiao)幾(ji)下培(pei)養(yang)培(pei)養(yang)瓶,細(xi)胞隨即(ji)脫落下來。
3. 加(jia)入6-8ml*培養基(ji),吸(xi)出,分到新(xin)的培養瓶中。1:3~1:6傳代;2~3天(tian)1次。
。
注意(yi):傳代(dai)后一(yi)(yi)半用(yong)我們(men)(men)的培(pei)養(yang)基,一(yi)(yi)半用(yong)你(ni)們(men)(men)的,以免細胞不適應而造
成生長不好。
凍存方法: 凍存液:基(ji)礎(chu)培養基(ji)+5%DMSO+20%FBS
儲存:液氮儲存
ATCC 細(xi)(xi)胞(bao)|細(xi)(xi)胞(bao)系|細(xi)(xi)胞(bao)株|腫瘤細(xi)(xi)胞(bao)|細(xi)(xi)胞(bao)|貼(tie)壁細(xi)(xi)胞(bao)|懸浮細(xi)(xi)胞(bao)|,細(xi)(xi)胞(bao)庫管理規范(fan),提供的細(xi)(xi)胞(bao)株背(bei)景(jing)清楚,提供參(can)考文獻優培養條(tiao)件
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