簡要描述:293LVT細胞, 人胚腎細胞--用于慢病毒包裝ATCC 細(xi)(xi)胞(bao)(bao)|細(xi)(xi)胞(bao)(bao)系|細(xi)(xi)胞(bao)(bao)株(zhu)|腫瘤(liu)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)|細(xi)(xi)胞(bao)(bao)|貼壁(bi)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)|懸浮細(xi)(xi)胞(bao)(bao)|,細(xi)(xi)胞(bao)(bao)庫管理(li)規(gui)范,提供的細(xi)(xi)胞(bao)(bao)株(zhu)背景清楚(chu),提供參考文獻(xian)和(he)*培養條件(jian)
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293LVT細胞, 人胚腎細胞--用于慢病毒包裝
培養條件:
*培養基:DMEM高糖培養基90%;胎牛血清(qing)10%。
培(pei)養條件(jian):37.0C carbon dioxide(CO2),5%
293LVT細胞, 人胚腎細胞--用于慢病毒包裝
傳代方法:
收(shou)到細(xi)(xi)胞(bao)后(hou),取出(chu)培養(yang)瓶在倒(dao)置顯微鏡下(xia)觀察細(xi)(xi)胞(bao)生(sheng)長情況。
(一)如(ru)果細胞未長滿,用75%酒(jiu)精噴灑整個瓶消毒后(hou)放到超菌臺內(nei),嚴(yan)格無菌操作(zuo),打開細胞培(pei)養瓶,吸出培(pei)養液,僅留(liu)下10ml培(pei)養液在瓶內(nei)繼(ji)續培(pei)養。
(二)如(ru)果細胞已長(chang)滿,即可進(jin)行傳(chuan)代培(pei)養(yang)。具(ju)體步(bu)驟(zou)如(ru)下(xia):
1. 棄去培(pei)養液(ye),用(yong)PBS(不含鈣,鎂離子)洗1-2次。
2. 加1ml消化(hua)液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培(pei)(pei)養(yang)瓶(ping)中,倒轉放于37度培(pei)(pei)養(yang)箱1-3分鐘預熱,然后(hou)又將培(pei)(pei)養(yang)瓶(ping)倒轉大約30秒后(hou),在倒置顯(xian)微鏡下(xia)(xia)(xia)觀察細(xi)(xi)胞消化(hua)情(qing)況(kuang),若(ruo)細(xi)(xi)胞大部分變圓分散(san),輕敲幾下(xia)(xia)(xia)培(pei)(pei)養(yang)培(pei)(pei)養(yang)瓶(ping),細(xi)(xi)胞隨(sui)即脫落下(xia)(xia)(xia)來。
3. 加入6-8ml*培(pei)養基(ji),吸出,分到新的培(pei)養瓶中(zhong)。1:3~1:6傳(chuan)代(dai);2~3天1次。
。
注意:傳代后一半用我們的(de)培(pei)養基,一半用你們的(de),以免細胞不(bu)適應(ying)而造
成生長不好。
凍存(cun)方法(fa): 凍存(cun)液(ye):基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
儲存:液氮儲存
ATCC 細(xi)(xi)胞|細(xi)(xi)胞系|細(xi)(xi)胞株|腫瘤(liu)細(xi)(xi)胞|細(xi)(xi)胞|貼壁(bi)細(xi)(xi)胞|懸浮(fu)細(xi)(xi)胞|,細(xi)(xi)胞庫(ku)管(guan)理規范,提(ti)供(gong)的(de)細(xi)(xi)胞株背景清楚,提(ti)供(gong)參(can)考文(wen)獻和優培(pei)養條(tiao)件
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