簡要(yao)描述:QBC939 細胞,人膽管癌細胞ATCC 細胞(bao)(bao)|細胞(bao)(bao)系|細胞(bao)(bao)株(zhu)|腫瘤細胞(bao)(bao)|細胞(bao)(bao)|貼壁(bi)細胞(bao)(bao)|懸浮細胞(bao)(bao)|,細胞(bao)(bao)庫管理(li)規(gui)范,提供的細胞(bao)(bao)株(zhu)背景(jing)清楚(chu),提供參(can)考文(wen)獻和*培養條件
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QBC939 細胞,人膽管癌細胞
*培(pei)養基:DMEM高糖(tang)培(pei)養基90%;胎牛血清10%。
培養條件:37.0C carbon dioxide(CO2),5%
QBC939 細胞,人膽管癌細胞
傳代方法:
收到細胞(bao)后,取(qu)出(chu)培(pei)養瓶(ping)在倒(dao)置顯微(wei)鏡下觀察細胞(bao)生長情(qing)況。
(一)如果細胞(bao)(bao)未(wei)長滿,用(yong)75%酒精噴(pen)灑整個瓶(ping)消(xiao)毒后放到(dao)超菌臺內(nei)(nei),嚴格(ge)無菌操作(zuo),打開細胞(bao)(bao)培養(yang)瓶(ping),吸出培養(yang)液,僅(jin)留下10ml培養(yang)液在瓶(ping)內(nei)(nei)繼續(xu)培養(yang)。
(二)如果細胞已(yi)長滿,即可進行傳代培養。具(ju)體步驟(zou)如下:
1. 棄去培養(yang)液(ye),用PBS(不含鈣,鎂離子(zi))洗1-2次。
2. 加(jia)1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培(pei)養瓶(ping)中,倒轉(zhuan)放于37度培(pei)養箱1-3分(fen)鐘預(yu)熱,然后(hou)又將培(pei)養瓶(ping)倒轉(zhuan)大(da)約30秒后(hou),在倒置顯微鏡下(xia)觀察細(xi)胞(bao)消化情況(kuang),若細(xi)胞(bao)大(da)部分(fen)變圓(yuan)分(fen)散,輕敲幾下(xia)培(pei)養培(pei)養瓶(ping),細(xi)胞(bao)隨即脫落下(xia)來。
3. 加入6-8ml*培養基,吸出(chu),分到新的培養瓶中。1:3~1:6傳代;2~3天1次。
。
注意:傳代后一半用我們(men)的培養基,一半用你們(men)的,以免細胞不適應而造(zao)
成生長不好。
凍(dong)存(cun)方法: 凍(dong)存(cun)液:基(ji)礎培養基(ji)+5%DMSO+20%FBS
儲存:液氮儲存
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