簡要描述(shu):HN13細胞, 口腔鱗狀細胞癌細胞ATCC 細(xi)胞(bao)|細(xi)胞(bao)系(xi)|細(xi)胞(bao)株(zhu)(zhu)|腫瘤細(xi)胞(bao)|細(xi)胞(bao)|貼壁(bi)細(xi)胞(bao)|懸浮細(xi)胞(bao)|,細(xi)胞(bao)庫管理規范,提供的細(xi)胞(bao)株(zhu)(zhu)背(bei)景(jing)清楚,提供參考(kao)文獻和*培(pei)養條件
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HN13細胞, 口腔鱗狀細胞癌細胞
培養條件:
*培養基(ji):DMEM高糖培養基(ji)90%;胎(tai)牛血(xue)清10%。
培養(yang)條件:37.0C carbon dioxide(CO2),5%
HN13細胞, 口腔鱗狀細胞癌細胞
傳代方法:
收到(dao)細胞后,取出培養瓶在(zai)倒置顯微鏡下觀察細胞生長(chang)情況(kuang)。
(一(yi))如果細(xi)胞(bao)未長滿(man),用75%酒精噴灑整個(ge)瓶(ping)消毒后放到(dao)超菌臺內,嚴(yan)格無菌操作,打開細(xi)胞(bao)培養(yang)瓶(ping),吸出培養(yang)液,僅留下10ml培養(yang)液在瓶(ping)內繼續(xu)培養(yang)。
(二)如(ru)果細胞已長(chang)滿,即(ji)可進行傳(chuan)代培養(yang)。具體步驟如(ru)下:
1. 棄(qi)去培養液,用PBS(不含鈣,鎂離(li)子)洗(xi)1-2次。
2. 加1ml消(xiao)化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于(yu)培(pei)養(yang)瓶中,倒(dao)轉(zhuan)放于(yu)37度培(pei)養(yang)箱1-3分鐘預熱,然后(hou)又將(jiang)培(pei)養(yang)瓶倒(dao)轉(zhuan)大約(yue)30秒后(hou),在倒(dao)置(zhi)顯微鏡下觀察細(xi)胞(bao)消(xiao)化情(qing)況,若細(xi)胞(bao)大部分變圓分散,輕敲幾下培(pei)養(yang)培(pei)養(yang)瓶,細(xi)胞(bao)隨(sui)即脫落下來(lai)。
3. 加入6-8ml*培(pei)養(yang)基(ji),吸(xi)出,分到新的培(pei)養(yang)瓶(ping)中。1:3~1:6傳代;2~3天1次。
。
注意:傳代(dai)后一半用(yong)(yong)我們的培養基,一半用(yong)(yong)你們的,以免細胞(bao)不(bu)適應而造
成生長不好。
凍存方(fang)法: 凍存液:基礎培養(yang)基+5%DMSO+20%FBS
儲存:液氮儲存
ATCC 細(xi)(xi)胞(bao)(bao)|細(xi)(xi)胞(bao)(bao)系(xi)|細(xi)(xi)胞(bao)(bao)株|腫(zhong)瘤(liu)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)|細(xi)(xi)胞(bao)(bao)|貼壁細(xi)(xi)胞(bao)(bao)|懸浮細(xi)(xi)胞(bao)(bao)|,細(xi)(xi)胞(bao)(bao)庫管(guan)理規(gui)范,提(ti)供的(de)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)株背景清(qing)楚,提(ti)供參考文獻和(he)優(you)培養條件
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