簡要(yao)描述:SPC-A-1細胞, 人肺腺癌細胞ATCC 細(xi)胞(bao)|細(xi)胞(bao)系|細(xi)胞(bao)株|腫瘤(liu)細(xi)胞(bao)|細(xi)胞(bao);細(xi)胞(bao)庫(ku)管理規范(fan),提供的細(xi)胞(bao)株背景(jing)清楚(chu),提供參考文(wen)獻和*培養條件! 這株細(xi)胞(bao)源(yuan)自一(yi)位男性肺腺癌患者。
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SPC-A-1細胞, 人肺腺癌細胞
*培養基: RPMI 1640+10%胎牛血(xue)清
培養條件:37.0C carbon dioxide(CO2),5%
SPC-A-1細胞, 人肺腺癌細胞
傳代方法:
收到細胞后,取(qu)出培養瓶在倒置顯(xian)微鏡(jing)下觀察細胞生長情況。
(一(yi))如果細(xi)胞未長(chang)滿(man),用75%酒精噴(pen)灑整個瓶(ping)消毒(du)后(hou)放到超(chao)菌臺內(nei),嚴格無菌操作,打開(kai)細(xi)胞培(pei)(pei)養(yang)瓶(ping),吸出(chu)培(pei)(pei)養(yang)液(ye),僅留下10ml培(pei)(pei)養(yang)液(ye)在(zai)瓶(ping)內(nei)繼續培(pei)(pei)養(yang)。
(二(er))如果細胞已長(chang)滿(man),即可進行傳(chuan)代培養。具體(ti)步驟如下:
1. 棄去培(pei)養液,用(yong)PBS(不含(han)鈣,鎂離子)洗1-2次(ci)。
2. 加(jia)1ml消(xiao)化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培(pei)養(yang)瓶中,倒轉放于37度培(pei)養(yang)箱1-3分鐘預熱,然后又將培(pei)養(yang)瓶倒轉大約30秒后,在倒置(zhi)顯微鏡(jing)下觀察細胞消(xiao)化情況,若細胞大部分變圓分散,輕(qing)敲(qiao)幾(ji)下培(pei)養(yang)培(pei)養(yang)瓶,細胞隨即(ji)脫落下來。
3. 加入6-8ml*培(pei)養(yang)基,吸出,分到新(xin)的培(pei)養(yang)瓶中。一傳二。
注意:傳代后一半(ban)用我們的(de)(de)培養基,一半(ban)用你們的(de)(de),以免細(xi)胞不適應(ying)而造
成生長不好。
凍存方法: 凍存液:95%*培養液,5%DMSO
儲存:液氮儲存
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