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HCE-8962細胞, 人盲腸未分化癌細胞
*培(pei)養(yang)基(ji)(ji):DMEM高糖(tang)培(pei)養(yang)基(ji)(ji)90%;胎牛血清10%。
培養(yang)條件:37.0C carbon dioxide(CO2),5%
HCE-8962細胞, 人盲腸未分化癌細胞
傳代方法:
收到細胞后(hou),取出培養瓶(ping)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長(chang)情(qing)況(kuang)。
(一)如果細(xi)胞未長滿,用75%酒精噴(pen)灑(sa)整個瓶消(xiao)毒(du)后(hou)放到超菌(jun)臺內(nei),嚴格無菌(jun)操作,打開細(xi)胞培養(yang)瓶,吸出培養(yang)液,僅留下10ml培養(yang)液在瓶內(nei)繼續培養(yang)。
(二(er))如果細胞(bao)已長滿,即可進(jin)行傳代培養。具體步驟如下:
1. 棄去培(pei)養液,用PBS(不含鈣,鎂離子)洗1-2次(ci)。
2. 加1ml消化(hua)液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培(pei)養瓶中(zhong),倒(dao)(dao)轉(zhuan)放于37度培(pei)養箱1-3分(fen)鐘(zhong)預(yu)熱(re),然后(hou)又將(jiang)培(pei)養瓶倒(dao)(dao)轉(zhuan)大約30秒后(hou),在(zai)倒(dao)(dao)置(zhi)顯微鏡下觀察細(xi)胞(bao)消化(hua)情況,若(ruo)細(xi)胞(bao)大部分(fen)變圓分(fen)散,輕敲幾下培(pei)養培(pei)養瓶,細(xi)胞(bao)隨即脫落下來。
3. 加入(ru)6-8ml*培養(yang)(yang)基,吸出,分到新的(de)培養(yang)(yang)瓶中(zhong)。1:3~1:6傳代;2~3天1次(ci)。
。
注意:傳代后一(yi)半用我們(men)的培養基,一(yi)半用你們(men)的,以免(mian)細胞不(bu)適應而(er)造(zao)
成生長(chang)不好。
凍存(cun)方(fang)法: 凍存(cun)液:基(ji)礎培(pei)養(yang)基(ji)+5%DMSO+20%FBS
儲(chu)存(cun):液氮儲(chu)存(cun)
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