簡要描述:JEG 細胞,人絨毛膜癌細胞ATCC 細(xi)(xi)胞(bao)|細(xi)(xi)胞(bao)系(xi)|細(xi)(xi)胞(bao)株(zhu)(zhu)|腫瘤細(xi)(xi)胞(bao)|細(xi)(xi)胞(bao);細(xi)(xi)胞(bao)庫管理(li)規范,提(ti)供(gong)的(de)細(xi)(xi)胞(bao)株(zhu)(zhu)背景清(qing)楚(chu),提(ti)供(gong)參考文獻和*培養條件!
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JEG 細胞,人絨毛膜癌細胞
*培養基:DMEM高糖(tang)培養基90%;胎牛血(xue)清10%。
培養條件:37.0C carbon dioxide(CO2),5%
JEG 細胞,人絨毛膜癌細胞
傳代方法:
收到細(xi)胞后,取出(chu)培養瓶在倒置顯微鏡(jing)下觀察(cha)細(xi)胞生(sheng)長情況(kuang)。
(一)如果細胞(bao)未長滿,用(yong)75%酒精噴灑整個瓶(ping)消毒后放到超菌(jun)臺內,嚴格無菌(jun)操作,打(da)開(kai)細胞(bao)培(pei)養(yang)瓶(ping),吸出培(pei)養(yang)液(ye),僅(jin)留下(xia)10ml培(pei)養(yang)液(ye)在(zai)瓶(ping)內繼續培(pei)養(yang)。
(二)如果細(xi)胞已(yi)長滿,即可(ke)進(jin)行傳(chuan)代培養(yang)。具體步驟(zou)如下:
1. 棄去培(pei)養液,用(yong)PBS(不含鈣,鎂離子)洗(xi)1-2次。
2. 加1ml消(xiao)化(hua)液(ye)(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培(pei)(pei)養(yang)瓶中,倒(dao)(dao)轉(zhuan)放于37度培(pei)(pei)養(yang)箱1-3分鐘(zhong)預熱,然后又將培(pei)(pei)養(yang)瓶倒(dao)(dao)轉(zhuan)大約(yue)30秒(miao)后,在(zai)倒(dao)(dao)置顯微鏡下(xia)觀察細(xi)胞(bao)消(xiao)化(hua)情況,若細(xi)胞(bao)大部分變圓(yuan)分散,輕敲(qiao)幾下(xia)培(pei)(pei)養(yang)培(pei)(pei)養(yang)瓶,細(xi)胞(bao)隨即脫落下(xia)來(lai)。
3. 加入6-8ml*培養基,吸出,分到新的培養瓶中。1:3~1:6傳代;2~3天(tian)1次。
。
注(zhu)意:傳(chuan)代后一半用我們(men)(men)的培養基(ji),一半用你(ni)們(men)(men)的,以免細胞不適應而造
成生長不好。
凍存方(fang)法(fa): 凍存液:基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
儲存(cun):液氮儲存(cun)
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