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P69細胞, 前列腺癌細胞
培養條件:
*培養基:DMEM高糖培養基90%;胎牛血清10%。
培(pei)養條(tiao)件:37.0C carbon dioxide(CO2),5%
P69細胞, 前列腺癌細胞
傳代(dai)方法:
收到細胞(bao)后(hou),取(qu)出培養瓶在倒置顯微(wei)鏡下觀(guan)察(cha)細胞(bao)生長(chang)情況。
(一)如果細(xi)胞(bao)未長(chang)滿,用(yong)75%酒精噴灑整個(ge)瓶消毒(du)后放到超菌臺內,嚴(yan)格(ge)無菌操作,打(da)開細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)瓶,吸(xi)出(chu)培(pei)養(yang)液,僅(jin)留下10ml培(pei)養(yang)液在(zai)瓶內繼續培(pei)養(yang)。
(二)如果細胞已長滿,即可進傳代培養。具體步驟如下:
1. 棄去培養(yang)液,用PBS(不含鈣,鎂離子行)洗1-2次。
2. 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yang)瓶中,倒(dao)轉(zhuan)放于37度(du)培養(yang)箱1-3分鐘預(yu)熱,然后又將培養(yang)瓶倒(dao)轉(zhuan)大約30秒后,在倒(dao)置顯微鏡下觀察細(xi)胞(bao)消化情況,若細(xi)胞(bao)大部(bu)分變圓分散,輕敲幾下培養(yang)培養(yang)瓶,細(xi)胞(bao)隨即脫落下來(lai)。
3. 加入6-8ml*培(pei)養基,吸(xi)出,分到新的培(pei)養瓶中。1:3~1:6傳代;2~3天1次(ci)。
。
注意:傳代后一半用(yong)我們的培養基,一半用(yong)你們的,以(yi)免細胞不(bu)適應而(er)造
成生(sheng)長不好。
凍存方法: 凍存液:基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
儲(chu)存(cun):液氮儲(chu)存(cun)
ATCC 細胞|細胞系|細胞株|腫瘤細胞|細(xi)胞|貼壁細(xi)胞|懸浮細(xi)胞|,細(xi)胞庫管(guan)理規范,提供的(de)細胞株背(bei)景清楚,提供參考文獻和(he)優培養(yang)條件
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