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MNK-7細胞, 人乳腺癌細胞
培養條件:*培養基: 1640+10%胎牛血清
:37.0C carbon dioxide(CO2),5%
MNK-7細胞, 人乳腺癌細胞
傳代方法:
收到細胞后,取出培養瓶(ping)在倒(dao)置顯(xian)微鏡下觀察(cha)細胞生長情(qing)況。
(一)如果(guo)細胞未長滿,用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放(fang)到超菌臺(tai)內,嚴格無(wu)菌操作,打開細胞培養瓶,吸(xi)出培養液,僅(jin)留下10ml培養養。液在瓶內繼(ji)續(xu)培
(二)如果細胞已長滿,即可進行傳(chuan)代(dai)培(pei)養。具體步驟如下:
1. 棄去培養(yang)液,用PBS(不(bu)含鈣(gai),鎂離子)洗(xi)1-2次。
2. 加(jia)1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yang)瓶中(zhong),倒(dao)轉放于37度培養(yang)箱1-3分鐘預(yu)熱,然后又將培養(yang)瓶倒(dao)轉大約30秒后,在倒(dao)置(zhi)顯微鏡下(xia)觀察(cha)細胞消化情(qing)況,若細胞大部分變圓分散,輕敲幾下(xia)培養(yang)培養(yang)瓶,細胞隨即(ji)脫落下(xia)來。
3. 加(jia)入6-8ml*培養基,吸出,分到新的培養瓶中。一傳(chuan)二。
注意:傳代后一瓶用(yong)我們的培養基,一瓶用(yong)你(ni)們的,以免(mian)細胞不適應而造
成生長不好。
凍(dong)(dong)存方法: 凍(dong)(dong)存液(ye):95%*培(pei)養液(ye),5%DMSO
儲存:液氮儲存
注意:傳代(dai)后一瓶用我們的培養(yang)基,一瓶用你們的,以免細胞(bao)不適(shi)應而造
成生長不好。
凍存方(fang)法: 凍存液(ye):95%*培養(yang)液(ye),5%DMSO
儲存:液氮儲存
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