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D6細胞，人肺腺癌細胞
*培(pei)養基(ji)：DMEM高(gao)糖培(pei)養基(ji)90%；胎牛血(xue)清(qing)10%。
D6細胞，人肺腺癌細胞
培養(yang)條件：37.0C carbon dioxide(CO2),5%
傳代(dai)方法：
收(shou)到細胞后，取出(chu)培(pei)養瓶在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情(qing)況。
（一）如果細胞未長滿(man)，用(yong)75%酒精噴灑整個瓶(ping)消毒后(hou)放到超菌(jun)(jun)臺內(nei)，嚴格(ge)無(wu)菌(jun)(jun)操作，打開細胞培養(yang)(yang)瓶(ping)，吸出(chu)培養(yang)(yang)液，僅留(liu)下10ml培養(yang)(yang)液在瓶(ping)內(nei)繼續培養(yang)(yang)。
(二)如果細(xi)胞已長滿，即可進(jin)行傳(chuan)代培養。具體步(bu)驟如下：
1. 棄去(qu)培養液，用PBS（不含鈣(gai)，鎂離(li)子）洗1-2次。
2. 加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于(yu)培(pei)(pei)養(yang)瓶(ping)中，倒(dao)(dao)轉放于(yu)37度(du)培(pei)(pei)養(yang)箱1-3分鐘預(yu)熱，然后(hou)又將培(pei)(pei)養(yang)瓶(ping)倒(dao)(dao)轉大(da)約30秒(miao)后(hou)，在倒(dao)(dao)置顯微鏡(jing)下觀察細胞(bao)消化情況，若細胞(bao)大(da)部分變圓分散，輕敲(qiao)幾下培(pei)(pei)養(yang)培(pei)(pei)養(yang)瓶(ping)，細胞(bao)隨即脫落下來。
3. 加入6-8ml*培養基，吸(xi)出，分到新(xin)的培養瓶中。1:3~1:6傳(chuan)代；2~3天1次(ci)。
。
注意：傳代后一(yi)半用我(wo)們的(de)培養基，一(yi)半用你們的(de)，以(yi)免(mian)細胞不(bu)適應而造
成生長不(bu)好。
凍存方(fang)法： 凍存液(ye)：基礎培(pei)養基+5%DMSO+20%FBS
儲存(cun)：液氮(dan)儲存(cun)
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