簡要(yao)描述(shu):HS77細胞, 人肺小細胞肺癌細胞ATCC 細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)|細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)系(xi)|細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)株(zhu)|腫瘤(liu)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)|細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao);細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)庫管(guan)理(li)規范(fan),提供(gong)的細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)株(zhu)背景(jing)清(qing)楚,提供(gong)參考文獻和*培(pei)養條件!
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HS77細胞, 人肺小細胞肺癌細胞
*培(pei)養基:DMEM高(gao)糖培(pei)養基90%;胎牛血(xue)清10%。
培養條件:37.0C carbon dioxide(CO2),5%
HS77細胞, 人肺小細胞肺癌細胞
傳代方法:
收到細(xi)(xi)胞后,取出培養瓶(ping)在倒(dao)置顯微鏡(jing)下觀察細(xi)(xi)胞生長情況(kuang)。
(一(yi))如(ru)果(guo)細胞(bao)未長滿,用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到(dao)超(chao)菌臺內(nei),嚴格無(wu)菌操作,打開細胞(bao)培(pei)養(yang)瓶,吸出培(pei)養(yang)液,僅留下(xia)10ml培(pei)養(yang)液在瓶內(nei)繼續(xu)培(pei)養(yang)。
(二)如(ru)果(guo)細胞已長滿,即可進行傳代培養。具體步(bu)驟(zou)如(ru)下:
1. 棄去培養(yang)液(ye),用PBS(不含鈣,鎂離子)洗1-2次。
2. 加1ml消化(hua)(hua)液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yang)瓶中,倒(dao)轉放于37度(du)培養(yang)箱(xiang)1-3分(fen)鐘預熱,然后又(you)將培養(yang)瓶倒(dao)轉大約30秒后,在倒(dao)置顯微鏡下觀(guan)察細胞消化(hua)(hua)情況,若細胞大部分(fen)變圓分(fen)散,輕(qing)敲幾下培養(yang)培養(yang)瓶,細胞隨即脫落下來。
3. 加入6-8ml*培養(yang)基,吸出,分到新的培養(yang)瓶中。1:3~1:6傳代(dai);2~3天1次。
。
注意:傳代后一半(ban)用(yong)我們的培養(yang)基,一半(ban)用(yong)你們的,以(yi)免細胞不(bu)適應而造
成生長不(bu)好(hao)。
凍存方(fang)法: 凍存液(ye):基礎培(pei)養基+5%DMSO+20%FBS
儲存(cun):液氮儲存(cun)
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