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Ishikawa細胞， 人子宮內膜癌細胞
培養(yang)條件： *培養(yang)基：RPMI 1640+10%胎牛血清或新生牛血清
培養條件：37.0C carbon dioxide(CO2),5%
Ishikawa細胞， 人子宮內膜癌細胞
傳代方法：
收到(dao)細胞后，取出培養(yang)瓶在倒置(zhi)顯微鏡下觀察細胞生(sheng)長(chang)情況。
（一(yi)）如果(guo)細(xi)胞未長滿，用75%酒精(jing)噴灑整個瓶消毒后放到超菌(jun)臺內(nei)，嚴格無菌(jun)操作，打開細(xi)胞培養(yang)(yang)瓶，吸出(chu)培養(yang)(yang)液，僅留下10ml培養(yang)(yang)液在瓶內(nei)繼續(xu)培養(yang)(yang)。
(二)如(ru)果細胞已長滿，即可進行(xing)傳代培養。具體步(bu)驟如(ru)下：
1. 棄去培養液，用PBS（不含鈣，鎂離(li)子）洗(xi)1-2次。
2. 加(jia)1ml消化液(ye)（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培(pei)養(yang)(yang)瓶(ping)(ping)中，倒(dao)轉放于37度培(pei)養(yang)(yang)箱(xiang)1-3分(fen)鐘預熱，然后又將培(pei)養(yang)(yang)瓶(ping)(ping)倒(dao)轉大約30秒(miao)后，在倒(dao)置顯微鏡(jing)下觀察細(xi)胞消化情(qing)況，若細(xi)胞大部分(fen)變圓分(fen)散，輕(qing)敲幾(ji)下培(pei)養(yang)(yang)培(pei)養(yang)(yang)瓶(ping)(ping)，細(xi)胞隨即脫落下來。
3. 加入6-8ml*培養基，吸出，分到(dao)新的培養瓶中。一傳二。
注(zhu)意(yi)：傳代后一半用(yong)我們的(de)培養基，一半用(yong)你們的(de)，以免細胞不適(shi)應而造(zao)
成生長不好。
凍存(cun)方法： 凍存(cun)液(ye)：95%*培養液(ye)，5%DMSO
儲存：液氮儲存
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