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SP 6.5細胞， 人眼脈洛膜黑色素瘤
培養(yang)條(tiao)件：
*培養(yang)基： DMEM，90%；胎牛血清10%。
SP 6.5細胞， 人眼脈洛膜黑色素瘤
培養(yang)條(tiao)件：37.0C carbon dioxide(CO2),5%
SP 6.5細胞， 人素瘤
傳代方(fang)法： 收到細胞后，取出培(pei)養瓶在眼脈洛膜黑色倒置顯(xian)微鏡(jing)下觀察細胞生長情(qing)況(kuang)。
（一）如果細胞未長滿，用75%酒精噴(pen)灑整個瓶(ping)(ping)消毒后放到(dao)超(chao)菌臺(tai)內，嚴(yan)格無菌操作，打開細胞培養瓶(ping)(ping)，吸出培養液，僅留下(xia)10ml培養液在瓶(ping)(ping)內繼(ji)續培養。
(二)如果細胞已長滿，即可進行傳代培(pei)養。具體步驟如下：
1. 棄去培養液(ye)，用PBS（不含鈣，鎂(mei)離子）洗(xi)1-2次。
2. 加(jia)1ml消化(hua)液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于(yu)培養(yang)(yang)瓶(ping)(ping)中，倒(dao)轉放于(yu)37度培養(yang)(yang)箱1-3分鐘(zhong)預熱，然后(hou)(hou)又將培養(yang)(yang)瓶(ping)(ping)倒(dao)轉大(da)約30秒后(hou)(hou)，在倒(dao)置顯微鏡下觀察(cha)細胞消化(hua)情況(kuang)，若細胞大(da)部分變圓分散，輕(qing)敲幾下培養(yang)(yang)培養(yang)(yang)瓶(ping)(ping)，細胞隨即(ji)脫落下來。
3. 加入6-8ml*培(pei)(pei)養(yang)基，吸出，分到新的培(pei)(pei)養(yang)瓶中(zhong)。一傳二。
注意：傳代后一(yi)半(ban)(ban)用我們的(de)培(pei)養基，一(yi)半(ban)(ban)用你們的(de)，以免細胞不(bu)適應而造
成生(sheng)長不好(hao)。
凍(dong)(dong)存方法(fa)： 凍(dong)(dong)存液：95%*培養液，5%DMSO
儲存：液氮儲存
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