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OM431細胞,人眼脈洛膜惡性黑色素瘤
培養條件:
*培養基: DMEM,90%;胎牛血清10%。
培養(yang)條件(jian):37.0C carbon dioxide(CO2),5%
OM431細胞,人眼脈洛膜惡性黑色素瘤
傳代方法:收到細(xi)胞后,取出培(pei)養瓶在(zai)倒置顯微鏡下觀察細(xi)胞生長(chang)情況。
(一)如果細胞(bao)未長滿,用75%酒精噴灑(sa)整個瓶消毒后放到超菌臺內(nei),嚴格(ge)無菌操作,打(da)開細胞(bao)培(pei)(pei)養(yang)(yang)瓶,吸出培(pei)(pei)養(yang)(yang)液,僅留下10ml培(pei)(pei)養(yang)(yang)液在瓶內(nei)繼續培(pei)(pei)養(yang)(yang)。
(二)如(ru)果細胞已長滿,即可進行傳代培(pei)養(yang)。具(ju)體(ti)步驟如(ru)下:
1. 棄(qi)去(qu)培養(yang)液,用PBS(不含鈣,鎂離子)洗1-2次。
2. 加1ml消化液(0.25%T置顯微鏡(jing)下觀察細胞消化情況(kuang),若細胞大(da)部分變圓分散(san),輕敲幾下培(pei)養培(pei)養瓶,細胞隨即脫落下來(lai)。rypsin-0.53mM EDTA)于培(pei)養瓶中(zhong),倒轉放于37度(du)培(pei)養箱(xiang)1-3分鐘預熱,然后又(you)將培(pei)養瓶倒轉大(da)約30秒后,在倒
3. 加入6-8ml*培(pei)養基(ji),吸出,分(fen)到新的培(pei)養瓶中。一傳二。
注意:傳(chuan)代后一(yi)半用我們(men)(men)的培養基,一(yi)半用你(ni)們(men)(men)的,以免細胞不適應而造(zao)
成生長(chang)不(bu)好。
凍(dong)存(cun)方(fang)法: 凍(dong)存(cun)液:95%*培養液,5%DMSO
儲存(cun):液氮儲存(cun)
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