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VUP細胞, 人眼脈洛膜惡性黑色素瘤
培養條件(jian):
*培養基: DMEM,90%;胎牛血清10%。
培養條件:37.0C carbon dioxide(CO2),5%
VUP細胞, 人眼脈洛膜惡性黑色素瘤
傳代(dai)方(fang)法:收到細胞后(hou),取出培養瓶在倒(dao)置(zhi)顯微(wei)鏡下(xia)觀察細胞生(sheng)長情況(kuang)。
(一)如果(guo)細(xi)胞未長(chang)滿(man),用75%酒精噴灑整個瓶消毒后(hou)放到超菌(jun)(jun)臺內(nei),嚴格無菌(jun)(jun)操作,打開細(xi)胞培養(yang)瓶,吸出培養(yang)液(ye),僅留下10ml培養(yang)液(ye)在(zai)瓶內(nei)繼(ji)續(xu)培養(yang)。
(二)如果細胞已長滿,即可進行傳代培(pei)養。具體步(bu)驟如下:
1. 棄去培養液,用PBS(不含鈣,鎂離子)洗1-2次。
2. 加(jia)1ml消(xiao)化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培(pei)(pei)養瓶中(zhong),倒轉放(fang)于37度培(pei)(pei)養箱1-3分(fen)(fen)鐘預熱(re),然(ran)后(hou)又(you)將培(pei)(pei)養瓶倒轉大約30秒后(hou),在倒置顯(xian)微鏡下(xia)觀察細胞消(xiao)化情況,若細胞大部分(fen)(fen)變(bian)圓分(fen)(fen)散,輕敲(qiao)幾下(xia)培(pei)(pei)養培(pei)(pei)養瓶,細胞隨即(ji)脫落下(xia)來(lai)。
3. 加入6-8ml*培(pei)養基(ji),吸出(chu),分(fen)到新的培(pei)養瓶中。一(yi)傳二。
注意:傳代后一半用我們的(de)培(pei)養基,一半用你們的(de),以免細胞不適應而造
成生長不好(hao)。
凍存(cun)方(fang)法: 凍存(cun)液:95%*培養液,5%DMSO
儲存(cun):液(ye)氮儲存(cun)
VUP 人(ren)眼脈洛膜惡性黑色素瘤,原代細胞|細胞系|細胞株|菌種(zhong);細胞(bao)庫管理規范,提(ti)供的細胞(bao)株(zhu)背景清(qing)楚(chu),提(ti)供參考文(wen)獻和i優培養條件
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