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NKM-1細胞， 人白血病細胞
培養條件(jian)： | *培(pei)養基： DMEM，90%；胎牛血清10%。 培(pei)養條件：37.0C carbon dioxide(CO2),5% NKM-1細胞， 人白血病細胞 | |
傳代方法(fa)： | 收到細胞(bao)(bao)后，取出培養瓶(ping)在倒置顯(xian)微鏡下觀察(cha)細胞(bao)(bao)生長情況。 （一）如果細胞(bao)未長(chang)滿(man)，用75%酒精噴灑整個瓶(ping)消(xiao)毒后放到超(chao)菌臺(tai)內，嚴(yan)格無菌操作，打開細胞(bao)培(pei)養(yang)(yang)瓶(ping)，吸出培(pei)養(yang)(yang)液(ye)，僅留下(xia)10ml培(pei)養(yang)(yang)液(ye)在瓶(ping)內繼續(xu)培(pei)養(yang)(yang)。 (二)如果細胞(bao)已長(chang)滿，即(ji)可進行傳(chuan)代培(pei)養。具體(ti)步驟如下(xia)： 1. 棄去培(pei)養液，用PBS（不含(han)鈣，鎂離子）洗1-2次。 2. 加(jia)1ml消化(hua)液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于(yu)培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)瓶中，倒轉放于(yu)37度培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)箱1-3分(fen)鐘(zhong)預(yu)熱(re)，然(ran)后又(you)將培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)瓶倒轉大約(yue)30秒后，在倒置顯微鏡下觀察(cha)細(xi)(xi)胞消化(hua)情況，若細(xi)(xi)胞大部(bu)分(fen)變圓分(fen)散，輕敲(qiao)幾下培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)瓶，細(xi)(xi)胞隨(sui)即(ji)脫落下來(lai)。 3. 加入6-8ml*培(pei)養基，吸出，分到新的培(pei)養瓶中。一傳二(er)。 注意(yi)：傳代后一(yi)半用(yong)(yong)我們的(de)培養(yang)基，一(yi)半用(yong)(yong)你們的(de)，以免細胞不適應而(er)造 成生(sheng)長不好。 | |
凍存方法： | 凍存(cun)液(ye)(ye)：95%*培養液(ye)(ye)，5%DMSO 儲(chu)存(cun)：液氮儲(chu)存(cun) ; | |
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