簡要描(miao)述:PLA-801D細胞, 人肺巨細胞癌細胞原代細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)|細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)系|細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)株(zhu)|菌種(zhong);細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)庫管(guan)理規(gui)范,提供(gong)的細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)株(zhu)背景(jing)清楚,提供(gong)參(can)考(kao)文獻和*培養(yang)條件(jian)!
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PLA-801D細胞, 人肺巨細胞癌細胞
培養條(tiao)件:
*培(pei)養基:DMEM高糖培(pei)養基90%;胎牛(niu)血清(qing)10%。
培養(yang)條件:37.0C carbon dioxide(CO2),5%
PLA-801D細胞, 人肺巨細胞癌細胞
傳(chuan)代方(fang)法(fa):
收到(dao)細胞后,取出培養瓶在倒置顯微鏡下(xia)觀察細胞生長情況。
(一)如(ru)果細(xi)胞未長滿,用(yong)75%酒精(jing)噴灑(sa)整(zheng)個瓶消(xiao)毒后放到超菌(jun)臺(tai)內,嚴格無(wu)菌(jun)操(cao)作,打開細(xi)胞培(pei)養瓶,吸出(chu)培(pei)養液(ye),僅留下(xia)10ml培(pei)養液(ye)在瓶內繼續培(pei)養。
(二)如果(guo)細胞(bao)已長滿,即(ji)可進行(xing)傳代培養(yang)。具體步驟如下(xia):
1. 棄去培養液(ye),用PBS(不含鈣,鎂離子)洗1-2次。
2. 加1ml消化(hua)(hua)液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yang)(yang)瓶(ping)(ping)中(zhong),倒轉(zhuan)放(fang)于37度培養(yang)(yang)箱1-3分鐘預熱(re),然后(hou)又將培養(yang)(yang)瓶(ping)(ping)倒轉(zhuan)大(da)約30秒后(hou),在(zai)倒置顯微鏡下(xia)觀察細胞(bao)消化(hua)(hua)情況,若細胞(bao)大(da)部(bu)分變圓分散(san),輕(qing)敲(qiao)幾下(xia)培養(yang)(yang)培養(yang)(yang)瓶(ping)(ping),細胞(bao)隨即脫(tuo)落下(xia)來。
3. 加入6-8ml*培(pei)養(yang)基,吸出,分(fen)到新的(de)培(pei)養(yang)瓶中。1:3~1:6傳(chuan)代;2~3天1次(ci)。
。
注意(yi):傳代后一半用(yong)我們的(de)培養基(ji),一半用(yong)你們的(de),以免(mian)細(xi)胞不適應(ying)而(er)造
成生(sheng)長(chang)不好。
凍存方(fang)法: 凍存液:基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
儲存:液氮(dan)儲存
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