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LTEP-S細胞, 人肺鱗癌細胞
培養(yang)條(tiao)件:
*培養基(ji):DMEM高(gao)糖(tang)培養基(ji)90%;胎牛(niu)血(xue)清10%。
培養條(tiao)件:37.0C carbon dioxide(CO2),5%
LTEP-S細胞, 人肺鱗癌細胞
傳(chuan)代方(fang)法:
收到細(xi)胞(bao)后,取(qu)出培(pei)養瓶在倒置顯微鏡下觀(guan)察細(xi)胞(bao)生(sheng)長情況。
(一)如果細胞未長滿(man),用75%酒精噴灑整個瓶(ping)消(xiao)毒后放到(dao)超菌臺內,嚴格無(wu)菌操作,打開細胞培養瓶(ping),吸出培養液,僅留下10ml培養液在瓶(ping)內繼續(xu)培養。
(二)如果細胞已長(chang)滿,即可(ke)進(jin)行傳代(dai)培養。具(ju)體(ti)步驟如下:
1. 棄去(qu)培養(yang)液,用(yong)PBS(不(bu)含鈣,鎂離子)洗1-2次。
2. 加1ml消(xiao)化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培(pei)養(yang)(yang)瓶中,倒轉放于37度培(pei)養(yang)(yang)箱1-3分鐘預熱,然后(hou)(hou)又將培(pei)養(yang)(yang)瓶倒轉大約30秒后(hou)(hou),在倒置顯微鏡(jing)下觀察細胞消(xiao)化情況,若(ruo)細胞大部分變(bian)圓分散,輕敲幾下培(pei)養(yang)(yang)培(pei)養(yang)(yang)瓶,細胞隨即脫落下來。
3. 加(jia)入6-8ml*培養基,吸出,分(fen)到新的培養瓶中。1:3~1:6傳代;2~3天1次。
。
注意:傳代后一半(ban)(ban)用我們(men)的培(pei)養基(ji),一半(ban)(ban)用你們(men)的,以免(mian)細(xi)胞不適應而造
成(cheng)生(sheng)長不(bu)好(hao)。
凍(dong)存(cun)(cun)方法(fa): 凍(dong)存(cun)(cun)液:基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
儲存:液(ye)氮儲存
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