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EC9706細胞， 人食管癌細胞
培養條件：
*培(pei)養(yang)基：DMEM高(gao)糖培(pei)養(yang)基90%；胎牛血清10%。
培養(yang)條(tiao)件：37.0C carbon dioxide(CO2),5%
EC9706細胞， 人食管癌細胞
傳(chuan)代方法：
收(shou)到細(xi)胞后，取(qu)出培(pei)養瓶在倒置顯微鏡下觀察細(xi)胞生長情況。
（一）如果細胞(bao)未(wei)長滿，用75%酒精噴灑(sa)整個(ge)瓶(ping)消毒后放(fang)到超菌(jun)臺內(nei)，嚴格無菌(jun)操作(zuo)，打開細胞(bao)培(pei)養(yang)(yang)瓶(ping)，吸(xi)出培(pei)養(yang)(yang)液(ye)，僅留下10ml培(pei)養(yang)(yang)液(ye)在瓶(ping)內(nei)繼續(xu)培(pei)養(yang)(yang)。
(二(er))如(ru)果細胞已長滿，即可進行傳代培養。具體步(bu)驟如(ru)下(xia)：
1. 棄去(qu)培養液(ye)，用(yong)PBS（不含鈣，鎂(mei)離子）洗(xi)1-2次。
2. 加1ml消化(hua)液(ye)（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培(pei)(pei)養(yang)瓶中，倒轉放于37度培(pei)(pei)養(yang)箱1-3分(fen)鐘(zhong)預熱(re)，然后又將(jiang)培(pei)(pei)養(yang)瓶倒轉大約30秒后，在倒置顯微鏡下(xia)觀察細(xi)胞消化(hua)情況，若細(xi)胞大部(bu)分(fen)變圓分(fen)散，輕敲幾下(xia)培(pei)(pei)養(yang)培(pei)(pei)養(yang)瓶，細(xi)胞隨即脫落下(xia)來。
3. 加入6-8ml*培養基，吸(xi)出，分到新的培養瓶中(zhong)。1:3~1:6傳代；2~3天1次(ci)。
。
注意(yi)：傳代后一半用(yong)我們(men)的培養基，一半用(yong)你們(men)的，以(yi)免(mian)細胞不適應而造
成生長不好。
凍存(cun)(cun)方法(fa)： 凍存(cun)(cun)液(ye)：基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
儲(chu)存：液氮儲(chu)存
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