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SUNE-1細胞, 人鼻咽低分化鱗癌細胞株
培(pei)養條件:
*培養(yang)基(ji):DMEM高糖培養(yang)基(ji)90%;胎牛血清10%。
培養條件:37.0C carbon dioxide(CO2),5%
SUNE-1細胞, 人鼻咽低分化鱗癌細胞株
傳(chuan)代方法:
收到細(xi)胞后,取出培養瓶在倒置顯(xian)微鏡下觀察細(xi)胞生長情(qing)況(kuang)。
(一(yi))如果細胞未長滿,用75%酒精(jing)噴灑整個(ge)瓶消毒后放(fang)到超菌(jun)臺(tai)內,嚴格(ge)無菌(jun)操作,打(da)開(kai)細胞培養(yang)瓶,吸(xi)出培養(yang)液(ye),僅(jin)留下10ml培養(yang)液(ye)在瓶內繼續培養(yang)。
(二)如果細胞已長滿,即可(ke)進(jin)行(xing)傳(chuan)代培養。具體步(bu)驟如下:
1. 棄去培養液,用(yong)PBS(不(bu)含鈣,鎂離子)洗1-2次。
2. 加1ml消化(hua)(hua)液(ye)(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yang)(yang)瓶(ping)(ping)中,倒轉放(fang)于37度(du)培養(yang)(yang)箱1-3分鐘預(yu)熱,然后又(you)將培養(yang)(yang)瓶(ping)(ping)倒轉大(da)約30秒后,在(zai)倒置顯微鏡下觀察細(xi)胞消化(hua)(hua)情(qing)況,若(ruo)細(xi)胞大(da)部分變圓(yuan)分散,輕(qing)敲幾下培養(yang)(yang)培養(yang)(yang)瓶(ping)(ping),細(xi)胞隨(sui)即脫(tuo)落(luo)下來(lai)。
3. 加入6-8ml*培(pei)養基,吸出,分到新的培(pei)養瓶中(zhong)。1:3~1:6傳代(dai);2~3天1次。
。
注意:傳代后(hou)一半用我們的培養基,一半用你們的,以免細胞不適應而(er)造(zao)
成生(sheng)長不(bu)好。
凍(dong)(dong)存方(fang)法: 凍(dong)(dong)存液:基(ji)礎(chu)培養基(ji)+5%DMSO+20%FBS
儲存(cun):液氮儲存(cun)
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