簡(jian)要描述:GNM 細胞,上頜牙齦癌頸淋巴結轉移癌原代細(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)|細(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)系|細(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)株|菌種;細(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)庫管(guan)理規(gui)范,提供的(de)細(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)株背(bei)景清楚,提供參考文獻和*培養(yang)條件!
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GNM 細胞,上頜牙齦癌頸淋巴結轉移癌
培養條件:
*培養(yang)基:DMEM高(gao)糖培養(yang)基90%;胎牛(niu)血清(qing)10%。
培養條件:37.0C carbon dioxide(CO2),5%
GNM 細胞,上頜牙齦癌頸淋巴結轉移癌
傳(chuan)代方(fang)法(fa):
收(shou)到細(xi)胞(bao)后,取(qu)出培養瓶在倒置顯微鏡下觀察細(xi)胞(bao)生長情(qing)況。
(一)如果細胞(bao)未長滿,用75%酒精噴灑整(zheng)個瓶消毒后(hou)放到(dao)超菌臺內,嚴格無(wu)菌操(cao)作,打開細胞(bao)培養(yang)瓶,吸出培養(yang)液,僅(jin)留下(xia)10ml培養(yang)液在瓶內繼(ji)續(xu)培養(yang)。
(二)如果(guo)細胞已長滿,即可進行傳代培(pei)養。具體步(bu)驟如下(xia):
1. 棄去培養(yang)液,用PBS(不含鈣,鎂離(li)子)洗(xi)1-2次。
2. 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于(yu)培(pei)養(yang)(yang)(yang)瓶(ping)(ping)中,倒(dao)轉放于(yu)37度培(pei)養(yang)(yang)(yang)箱1-3分鐘(zhong)預熱,然后又(you)將培(pei)養(yang)(yang)(yang)瓶(ping)(ping)倒(dao)轉大(da)約30秒后,在(zai)倒(dao)置(zhi)顯微鏡下(xia)觀察細(xi)(xi)胞消化情況,若細(xi)(xi)胞大(da)部分變圓分散,輕敲幾下(xia)培(pei)養(yang)(yang)(yang)培(pei)養(yang)(yang)(yang)瓶(ping)(ping),細(xi)(xi)胞隨即脫(tuo)落(luo)下(xia)來(lai)。
3. 加入6-8ml*培養(yang)基,吸出,分(fen)到新的培養(yang)瓶中(zhong)。1:3~1:6傳(chuan)代(dai);2~3天1次。
。
注意:傳代后一半(ban)用我們(men)的(de)培養基,一半(ban)用你(ni)們(men)的(de),以免細胞不適應而造
成生長不好。
凍(dong)(dong)存方法: 凍(dong)(dong)存液:基(ji)礎培養基(ji)+5%DMSO+20%FBS
儲存(cun):液氮(dan)儲存(cun)
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