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293 Ad5+細胞， 人原胚腎轉化細胞系
培養條件：
*培(pei)養(yang)基(ji)：DMEM高糖培(pei)養(yang)基(ji)90%；胎牛血清10%。
培養條件：37.0C carbon dioxide(CO2),5%
293 Ad5+細胞， 人原胚腎轉化細胞系
傳(chuan)代方(fang)法(fa)：
收到細(xi)胞(bao)后(hou)，取出培(pei)養(yang)瓶在倒置顯微(wei)鏡下觀(guan)察細(xi)胞(bao)生長情況。
（一）如果(guo)細胞(bao)未長(chang)滿，用75%酒精噴灑整(zheng)個瓶消毒后放到超菌(jun)臺內(nei)，嚴(yan)格無菌(jun)操作(zuo)，打開細胞(bao)培(pei)養瓶，吸(xi)出培(pei)養液(ye)，僅留下10ml培(pei)養液(ye)在瓶內(nei)繼(ji)續培(pei)養。
(二(er))如(ru)果細(xi)胞已長滿(man)，即可進行(xing)傳代培養。具體步驟如(ru)下：
1. 棄去培養(yang)液，用PBS（不含(han)鈣，鎂離(li)子(zi)）洗(xi)1-2次。
2. 加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培(pei)養(yang)(yang)瓶中，倒轉(zhuan)放于37度培(pei)養(yang)(yang)箱(xiang)1-3分(fen)鐘預熱，然(ran)后又將培(pei)養(yang)(yang)瓶倒轉(zhuan)大(da)約30秒后，在倒置顯(xian)微鏡(jing)下(xia)觀察細胞(bao)消化情況，若(ruo)細胞(bao)大(da)部分(fen)變(bian)圓(yuan)分(fen)散(san)，輕敲幾下(xia)培(pei)養(yang)(yang)培(pei)養(yang)(yang)瓶，細胞(bao)隨即脫落下(xia)來。
3. 加入6-8ml*培養(yang)基，吸出，分到新(xin)的(de)培養(yang)瓶(ping)中。1:3~1:6傳代(dai)；2~3天1次。
。
注意：傳代后一半用我們的培(pei)養基，一半用你(ni)們的，以免細胞(bao)不適應而造
成生長不(bu)好。
凍(dong)存(cun)方法： 凍(dong)存(cun)液：基(ji)礎培養(yang)基(ji)+5%DMSO+20%FBS
儲(chu)存：液(ye)氮儲(chu)存
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