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143TK細胞， 人胸腺激酶缺陷性細胞系
培(pei)養條件：
*培(pei)養(yang)基：DMEM高糖(tang)培(pei)養(yang)基90%；胎牛(niu)血清10%。
培養條件：37.0C carbon dioxide(CO2),5%
143TK細胞， 人胸腺激酶缺陷性細胞系
傳代(dai)方(fang)法：
收到細(xi)胞后，取出(chu)培養瓶在(zai)倒置顯微鏡(jing)下觀察(cha)細(xi)胞生長情況。
（一(yi)）如(ru)果細胞未長(chang)滿，用(yong)75%酒精噴(pen)灑(sa)整個瓶消毒后放(fang)到超菌臺內(nei)，嚴格無菌操作，打開細胞培(pei)養(yang)瓶，吸(xi)出培(pei)養(yang)液，僅(jin)留下10ml培(pei)養(yang)液在瓶內(nei)繼續培(pei)養(yang)。
(二)如(ru)果細(xi)胞已(yi)長滿，即(ji)可進行傳代培(pei)養。具體步(bu)驟如(ru)下：
1. 棄去培養(yang)液(ye)，用PBS（不含(han)鈣，鎂離子）洗1-2次。
2. 加1ml消(xiao)化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)瓶(ping)中，倒(dao)轉放(fang)于37度培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)箱1-3分鐘預熱，然(ran)后又將(jiang)培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)瓶(ping)倒(dao)轉大約30秒后，在倒(dao)置顯微鏡下(xia)觀察細(xi)(xi)胞消(xiao)化情(qing)況，若細(xi)(xi)胞大部分變圓分散，輕敲(qiao)幾下(xia)培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)瓶(ping)，細(xi)(xi)胞隨即(ji)脫落下(xia)來。
3. 加入6-8ml*培(pei)養(yang)基(ji)，吸(xi)出，分到新的培(pei)養(yang)瓶(ping)中。1:3~1:6傳代；2~3天1次。
。
注意：傳代后(hou)一半(ban)(ban)用我們的(de)(de)培(pei)養基(ji)，一半(ban)(ban)用你們的(de)(de)，以(yi)免細(xi)胞不(bu)適(shi)應(ying)而造(zao)
成生(sheng)長不好。
凍(dong)存(cun)方法(fa)： 凍(dong)存(cun)液(ye)：基(ji)礎(chu)培(pei)養基(ji)+5%DMSO+20%FBS
儲(chu)(chu)存(cun)：液氮(dan)儲(chu)(chu)存(cun)
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