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F56細胞, 人腺癌細胞系
培養條件:
*培養基:DMEM高糖培養基90%;胎牛血(xue)清10%。
培養條件:37.0C carbon dioxide(CO2),5%
F56細胞, 人腺癌細胞系
傳代(dai)方法:
收(shou)到細(xi)胞后,取出培養(yang)瓶在倒置顯微(wei)鏡(jing)下觀察細(xi)胞生長情(qing)況。
(一)如果細胞未(wei)長(chang)滿,用75%酒(jiu)精噴(pen)灑(sa)整個瓶消毒(du)后(hou)放到超(chao)菌(jun)臺內(nei),嚴格無菌(jun)操作(zuo),打開細胞培(pei)養(yang)瓶,吸(xi)出培(pei)養(yang)液(ye),僅留(liu)下10ml培(pei)養(yang)液(ye)在瓶內(nei)繼(ji)續培(pei)養(yang)。
(二(er))如果細胞(bao)已長滿,即可進行傳代培(pei)養(yang)。具體步驟如下:
1. 棄去(qu)培養液(ye),用PBS(不含鈣,鎂離子)洗1-2次。
2. 加1ml消(xiao)化(hua)液(ye)(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培(pei)養瓶中,倒轉放(fang)于37度培(pei)養箱1-3分鐘(zhong)預熱,然后又(you)將(jiang)培(pei)養瓶倒轉大(da)(da)約30秒后,在倒置顯微鏡下(xia)觀察細(xi)胞消(xiao)化(hua)情況,若細(xi)胞大(da)(da)部(bu)分變圓(yuan)分散,輕敲幾(ji)下(xia)培(pei)養培(pei)養瓶,細(xi)胞隨即(ji)脫落下(xia)來。
3. 加入6-8ml*培養(yang)(yang)基,吸出,分到(dao)新(xin)的(de)培養(yang)(yang)瓶中(zhong)。1:3~1:6傳代(dai);2~3天1次。
。
注意:傳(chuan)代(dai)后一半用(yong)我們的培養基,一半用(yong)你(ni)們的,以免(mian)細胞不適應(ying)而造
成生長不(bu)好。
凍存方法: 凍存液:基礎(chu)培養基+5%DMSO+20%FBS
儲存:液氮儲存
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