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TSCCA細胞,人舌鱗癌細胞系
培養(yang)條件:
*培(pei)養(yang)基:DMEM高糖培(pei)養(yang)基90%;胎(tai)牛(niu)血清10%。
培養(yang)條件(jian):37.0C carbon dioxide(CO2),5%
TSCCA細胞,人舌鱗癌細胞系
傳代方法:
收到細胞后,取出培養(yang)瓶在倒置顯微鏡下觀察細胞生(sheng)長(chang)情況。
(一(yi))如果細(xi)胞(bao)未長(chang)滿,用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超菌臺內,嚴格(ge)無(wu)菌操作,打開細(xi)胞(bao)培養(yang)(yang)瓶,吸出培養(yang)(yang)液,僅留下10ml培養(yang)(yang)液在瓶內繼續培養(yang)(yang)。
(二)如果細(xi)胞已長滿,即(ji)可進行傳代培養。具(ju)體步驟如下:
1. 棄去培養液,用PBS(不含鈣,鎂離子)洗1-2次(ci)。
2. 加1ml消(xiao)化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于(yu)培(pei)養(yang)瓶(ping)中,倒轉放于(yu)37度培(pei)養(yang)箱1-3分鐘(zhong)預熱(re),然后又將(jiang)培(pei)養(yang)瓶(ping)倒轉大約(yue)30秒后,在(zai)倒置(zhi)顯微(wei)鏡下(xia)觀察細(xi)胞(bao)消(xiao)化情況(kuang),若(ruo)細(xi)胞(bao)大部分變圓分散(san),輕(qing)敲(qiao)幾下(xia)培(pei)養(yang)培(pei)養(yang)瓶(ping),細(xi)胞(bao)隨(sui)即脫(tuo)落(luo)下(xia)來。
3. 加入6-8ml*培(pei)養基,吸出,分到(dao)新的培(pei)養瓶中。1:3~1:6傳代;2~3天1次(ci)。
。
注意:傳(chuan)代后一(yi)半用我們(men)的培養基(ji),一(yi)半用你們(men)的,以免細胞不(bu)適應而造
成(cheng)生長不好。
凍存方法: 凍存液:基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
儲存:液氮(dan)儲存
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