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Tca8113-P60細胞, 人舌癌細胞
培養條(tiao)件:
*培養基:DMEM高糖(tang)培養基90%;胎(tai)牛血(xue)清10%。
培養(yang)條件:37.0C carbon dioxide(CO2),5%
Tca8113-P60細胞, 人舌癌細胞
傳代方法:
收到細(xi)胞(bao)后,取(qu)出培養瓶在倒置顯(xian)微鏡下觀察細(xi)胞(bao)生長情況。
(一)如(ru)果細胞未長滿(man),用75%酒精噴灑整(zheng)個瓶(ping)消毒(du)后放到(dao)超菌臺內,嚴格(ge)無菌操作(zuo),打開細胞培養(yang)瓶(ping),吸出培養(yang)液(ye),僅留下10ml培養(yang)液(ye)在瓶(ping)內繼續培養(yang)。
(二)如果細胞已長滿,即(ji)可(ke)進行傳(chuan)代培養。具體步(bu)驟如下:
1. 棄去培養液,用PBS(不含(han)鈣(gai),鎂(mei)離子)洗1-2次(ci)。
2. 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于(yu)培(pei)養瓶(ping)(ping)中,倒(dao)(dao)轉放(fang)于(yu)37度培(pei)養箱1-3分鐘預(yu)熱,然后又將培(pei)養瓶(ping)(ping)倒(dao)(dao)轉大約30秒后,在倒(dao)(dao)置顯(xian)微鏡下(xia)觀察細胞(bao)消化情況,若細胞(bao)大部分變圓分散,輕敲(qiao)幾下(xia)培(pei)養培(pei)養瓶(ping)(ping),細胞(bao)隨即(ji)脫落下(xia)來。
3. 加入6-8ml*培(pei)養基,吸(xi)出,分(fen)到新的培(pei)養瓶(ping)中。1:3~1:6傳代(dai);2~3天1次。
。
注意:傳代后一(yi)半用我們的培養基,一(yi)半用你們的,以免(mian)細胞不適應而(er)造
成生長不好。
凍存方法: 凍存液:基礎(chu)培養基+5%DMSO+20%FBS
儲(chu)存(cun):液(ye)氮儲(chu)存(cun)
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