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1590細胞,人乳腺癌細胞系
培養(yang)條件:
*培(pei)(pei)養基:DMEM高糖(tang)培(pei)(pei)養基90%;胎牛血(xue)清10%。
培養條件:37.0C carbon dioxide(CO2),5%
1590細胞,人乳腺癌細胞系
傳代方(fang)法(fa):
收到細胞(bao)后(hou),取出培(pei)養瓶(ping)在倒置顯微(wei)鏡下觀察細胞(bao)生長情況。
(一)如果細胞未(wei)長滿,用75%酒精(jing)噴灑整個瓶(ping)消毒后放到(dao)超菌(jun)臺內,嚴格無菌(jun)操作(zuo),打開細胞培養(yang)瓶(ping),吸出培養(yang)液,僅留下10m即可進行傳代培(pei)養l培養液在瓶內繼(ji)續培養。
(二)如(ru)果細胞已長滿,。具體步驟如(ru)下:
1. 棄去培養液,用PBS(不(bu)含鈣,鎂(mei)離子(zi))洗1-2次。
2. 加1ml消化(hua)液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培(pei)養(yang)瓶中,倒(dao)轉放于37度培(pei)養(yang)箱1-3分鐘預熱,然(ran)后又將(jiang)培(pei)養(yang)瓶倒(dao)轉大約30秒后,在倒(dao)置顯(xian)微(wei)鏡下(xia)觀察細胞消化(hua)情況,若細胞大部分變(bian)圓分散(san),輕敲幾下(xia)培(pei)養(yang)培(pei)養(yang)瓶,細胞隨即脫落下(xia)來。
3. 加入6-8ml*培養(yang)基,吸出,分到新(xin)的培養(yang)瓶中。1:3~1:6傳代;2~3天1次。
。
注(zhu)意:傳(chuan)代(dai)后一半用(yong)我(wo)們的培養基(ji),一半用(yong)你(ni)們的,以免細胞不(bu)適應而造
成生(sheng)長不好。
凍(dong)(dong)存方法: 凍(dong)(dong)存液:基礎培(pei)養基+5%DMSO+20%FBS
儲存(cun)(cun):液氮儲存(cun)(cun)
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