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HB細胞， 人口腔癌細胞
培(pei)養條件：
*培養(yang)基：DMEM高糖培養(yang)基90%；胎牛(niu)血清10%。
培養條件：37.0C carbon dioxide(CO2),5%
HB細胞， 人口腔癌細胞
傳代(dai)方法：
收(shou)到細胞后，取(qu)出培養瓶(ping)在倒置顯微鏡下觀察(cha)細胞生(sheng)長情況。
（一）如果細胞未長滿(man)，用75%酒(jiu)精(jing)噴灑(sa)整個瓶(ping)消毒后放(fang)到超菌臺內，嚴格無菌操(cao)作，打開細胞培(pei)養瓶(ping)，吸出培(pei)養液，僅留(liu)下10ml培(pei)養液在(zai)瓶(ping)內繼續培(pei)養。
(二)如(ru)果細胞已(yi)長(chang)滿，即(ji)可進行傳代培養(yang)。具(ju)體(ti)步驟(zou)如(ru)下(xia)：
1. 棄去培養(yang)液，用PBS（不含鈣(gai)，鎂離子）洗1-2次。
2. 加1ml消化(hua)液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yang)瓶中，倒(dao)轉(zhuan)放于37度培養(yang)箱1-3分(fen)鐘預熱，然后(hou)(hou)又將培養(yang)瓶倒(dao)轉(zhuan)大(da)約30秒后(hou)(hou)，在倒(dao)置顯(xian)微鏡下(xia)觀察細胞(bao)消化(hua)情況，若細胞(bao)大(da)部分(fen)變圓分(fen)散，輕(qing)敲幾下(xia)培養(yang)培養(yang)瓶，細胞(bao)隨即(ji)脫落下(xia)來。
3. 加入6-8ml*培(pei)養基(ji)，吸出，分(fen)到新(xin)的培(pei)養瓶中。1:3~1:6傳代；2~3天1次。
。
注意(yi)：傳代后(hou)一(yi)(yi)半用我們的培養基，一(yi)(yi)半用你們的，以免細胞不適應而造
成生長不好。
凍(dong)(dong)存方法： 凍(dong)(dong)存液：基(ji)礎(chu)培養基(ji)+5%DMSO+20%FBS
儲(chu)存：液氮儲(chu)存
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