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簡要描述(shu)：MDA-MB-231-luc人乳腺癌細胞-熒光素酶標記|細(xi)(xi)胞(bao)(bao)系|細(xi)(xi)胞(bao)(bao)株|腫瘤細(xi)(xi)胞(bao)(bao)|細(xi)(xi)胞(bao)(bao)|貼(tie)壁細(xi)(xi)胞(bao)(bao)|懸浮細(xi)(xi)胞(bao)(bao)|,細(xi)(xi)胞(bao)(bao)庫管理(li)規范,提(ti)供的細(xi)(xi)胞(bao)(bao)株背景清楚,提(ti)供參考文獻和*培(pei)養條件
產品型(xing)號：MDA-MB-231-luc廠(chang)商性質：生產廠家 更新時(shi)間(jian)：2024-03-12訪 問 量：1564 產品分類
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MDA-MB-231-luc人乳腺癌細胞-熒光素酶標記
二、細胞收(shou)到后處(chu)理
細胞(bao)(bao)在培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)瓶(ping)(ping)(ping)(ping)(ping)中培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)至良好狀態后(hou)灌滿(man)*培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)液(ye)并封好瓶(ping)(ping)(ping)(ping)(ping)口是(shi)細胞(bao)(bao)運輸(shu)的好辦法。收(shou)到細胞(bao)(bao)回到自己的實驗室后(hou)，先打開外包裝，用(yong)(yong)75%酒精(jing)噴灑整個(ge)瓶(ping)(ping)(ping)(ping)(ping)消毒后(hou)放(fang)(fang)到超凈臺內，嚴(yan)格(ge)無(wu)菌(jun)操作，培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)箱靜(jing)置2-4小(xiao)時(shi)。鏡下觀(guan)察：未超過80%匯(hui)合度時(shi)，可(ke)將瓶(ping)(ping)(ping)(ping)(ping)裝的*培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)液(ye)收(shou)集至離心(xin)管中，加入(ru)6ml*培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)基，放(fang)(fang)入(ru)37℃、5%CO2孵箱培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)；超過80%匯(hui)合度時(shi)，根(gen)據情況傳代(dai)或者凍存，具體操作見細胞(bao)(bao)培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)步驟。（注意發(fa)貨的是(shi)密封培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)瓶(ping)(ping)(ping)(ping)(ping)的話，處理完(wan)后(hou)放(fang)(fang)入(ru)培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)箱培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)記得培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)瓶(ping)(ping)(ping)(ping)(ping)蓋子擰松(song)，傳代(dai)后(hou)建議(yi)一瓶(ping)(ping)(ping)(ping)(ping)用(yong)(yong)原瓶(ping)(ping)(ping)(ping)(ping)里面的*培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)基，另外一瓶(ping)(ping)(ping)(ping)(ping)用(yong)(yong)自己配的*培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)基）
三、細胞(bao)培養步驟
復蘇細(xi)(xi)(xi)胞(bao)：將(jiang)含有(you)1mL細(xi)(xi)(xi)胞(bao)懸液(ye)(ye)的凍存管在37℃水浴中迅速搖(yao)晃解(jie)凍，加入(ru)5mL培(pei)(pei)養(yang)基(ji)混合均(jun)勻(yun)。在1000RPM條件下(xia)離心5分鐘，棄去上清液(ye)(ye)，補加4-6mL*培(pei)(pei)養(yang)基(ji)后吹勻(yun)。然后將(jiang)所有(you)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)懸液(ye)(ye)加入(ru)培(pei)(pei)養(yang)瓶中培(pei)(pei)養(yang)過夜（或將(jiang)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)懸液(ye)(ye)加入(ru)6cm皿中），培(pei)(pei)養(yang)過夜。第二天換液(ye)(ye)并檢查細(xi)(xi)(xi)胞(bao)密度。
細胞(bao)傳代：如果細胞(bao)密度達80%-90%，即可進行傳代培(pei)養。
1、對于貼壁細胞，傳代可參考以(yi)下方(fang)法：
1. 棄(qi)去培(pei)養上(shang)清，用(yong)25%Trypsin-0.53mM EDTA）于(yu)培(pei)養(yang)(yang)瓶(ping)中(zhong)，置于(yu)37℃培(pei)養(yang)(yang)箱中(zhong)消化(hua)1-2min，然后在(zai)顯微鏡(jing)下觀察細胞(bao)消化(hua)情況，若細胞(bao)大部(bu)分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培(pei)養(yang)(yang)瓶(ping)后加(jia)5ml以上含(han)10%血清的*培(pei)養(yang)(yang)基終止消化(hua)。
3.輕輕吹打細胞，*脫(tuo)落后吸出，在1000RP不含(han)鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xi)胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液（0.M條(tiao)件下離心8-10分鐘，棄(qi)去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。
4. 按(an)5-6ml/瓶補加培養液，將細胞懸(xuan)液按(an)1：2到1：5的(de)比(bi)例分(fen)到新的(de)含5-6 ml培養液的(de)新皿(min)中(zhong)或者瓶中(zhong)。
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