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293A 人胚腎細胞系
培養條件:
*培養基:90%DMEM/F12(內含2mM L-glutamine)+10%胎牛血清
培養條件:37.0C carbon dioxide(CO2),5%
293A 人胚腎細胞系
傳代方法:
收到細胞后,取出培養瓶在倒置顯(xian)微鏡下(xia)觀察細胞生長情況。
(一)如果細胞未長(chang)滿,用(yong)75%酒精噴灑整(zheng)個瓶(ping)消毒后放到(dao)超(chao)菌臺內(nei),嚴格無菌操作,打開細胞培養瓶(ping),吸(xi)出培養液(ye),僅留(liu)下10ml培養液(ye)在瓶(ping)內(nei)繼續培養。
(二(er))如果細(xi)胞已長(chang)滿,即可進(jin)行傳代(dai)培養。具體步驟如下:
1. 棄去培養液(ye),用PBS(不含鈣,鎂(mei)離子(zi))洗1-2次。
2. 加(jia)1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yang)(yang)瓶(ping)中,倒轉放于37度(du)培養(yang)(yang)箱1-3分鐘預熱,然后又將(jiang)培養(yang)(yang)瓶(ping)倒轉大約30秒后,在(zai)倒置顯微鏡下觀察細胞(bao)消化情況,若細胞(bao)大部分變圓分散,輕敲幾下培養(yang)(yang)培養(yang)(yang)瓶(ping),細胞(bao)隨即脫落下來(lai)。
3. 加(jia)入6-8ml*培養基,吸出,分到(dao)新的培養瓶中(zhong)。一(yi)傳二。
注意:傳代后一(yi)半用我們的(de)培養基,一(yi)半用你們的(de),以免細(xi)胞不適應而(er)造
成生長不(bu)好(hao)。。。。。。
293A
凍存方法:
凍存液(ye):95%*培養液(ye),5%DMSO
儲存:液氮儲存
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