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HEK-293 人胚腎細胞系
培養條件:
*培養基: RPMI 1640+10%胎牛血(xue)清
培養條(tiao)件(jian):37.0C carbon dioxide(CO2),5%
HEK-293 人胚腎細胞系
HEK-293 系(xi)
傳代方法:
收到細胞后,取出培養瓶在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況。
(一)如果細胞未長滿,用75%酒精(jing)噴灑整個瓶消(xiao)毒后放到超菌臺內,嚴(yan)格(ge)無菌操作,打開細胞培(pei)(pei)養瓶,吸出培(pei)(pei)養液,僅(jin)留下(xia)10ml培(pei)(pei)養液在瓶內繼續(xu)培(pei)(pei)養。。
(二)如果細胞已長(chang)滿,即可進行傳代培養(yang)。具體(ti)步(bu)驟如下:
1. 棄去培(pei)養液(ye),用PBS(不含鈣,鎂離子(zi))洗(xi)1-2次。
2. 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培(pei)養瓶(ping)中,倒(dao)轉(zhuan)放于37度培(pei)養箱1-3分鐘預熱(re),然后又(you)將培(pei)養瓶(ping)倒(dao)轉(zhuan)大(da)約30秒后,在(zai)倒(dao)置顯微鏡下(xia)觀察(cha)細(xi)胞(bao)(bao)消化情況,若(ruo)細(xi)胞(bao)(bao)大(da)部分變圓分散,輕(qing)敲幾下(xia)培(pei)養培(pei)養瓶(ping),細(xi)胞(bao)(bao)隨即脫(tuo)落下(xia)來。
3. 加入(ru)6-8ml*培養基,吸出,分(fen)到新的培養瓶中。一(yi)傳二。。
注意:傳(chuan)代后一半用我們的培養(yang)基,一半用你們的,以免(mian)細胞不適應而(er)造
成生長不好。
HEK-293 系(xi)
凍(dong)存(cun)方法: 凍(dong)存(cun)液:95%*培養液,5%DMSO
儲存:液氮儲存
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