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SF-295 人XG惡性膠質瘤細胞
培養條件:
*培養基:DMEM高糖(tang)培養基90%;胎(tai)牛血清10%。
培養(yang)條(tiao)件:37.0C carbon dioxide(CO2),5%
SF-295 人XG惡性膠質瘤細胞
傳代方法:
收(shou)到細胞(bao)后,取出(chu)培養瓶在倒置顯微鏡下觀(guan)察細胞(bao)生長情況。
(一)如果細胞(bao)(bao)未長滿,用75%酒(jiu)精噴灑整個瓶消毒后放到超(chao)菌臺內(nei),嚴(yan)格無菌操作,打開細胞(bao)(bao)培養(yang)瓶,吸出培養(yang)液,僅留下10ml培養(yang)液在瓶內(nei)繼續(xu)培養(yang)。
(二)如(ru)果細(xi)胞已長滿,即可(ke)進行(xing)傳代培養。具體步驟如(ru)下:
1. 棄去培養(yang)液,用PBS(不含鈣,鎂(mei)離子)洗(xi)1-2次。
2. 加(jia)1ml消(xiao)化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于(yu)培(pei)養(yang)瓶(ping)中,倒(dao)轉放于(yu)37度培(pei)養(yang)箱1-3分鐘預熱,然后(hou)(hou)又將培(pei)養(yang)瓶(ping)倒(dao)轉大約30秒后(hou)(hou),在倒(dao)置顯微鏡下觀(guan)察細胞消(xiao)化情況,若細胞大部分變(bian)圓分散,輕敲(qiao)幾(ji)下培(pei)養(yang)培(pei)養(yang)瓶(ping),細胞隨(sui)即脫(tuo)落下來。
3. 加入6-8ml*培養基,吸(xi)出,分到(dao)新的培養瓶(ping)中。1:3~1:6傳代;2~3天1次。
。
注意:傳代(dai)后一(yi)半用(yong)(yong)我們的培養(yang)基,一(yi)半用(yong)(yong)你們的,以(yi)免細胞不適應(ying)而(er)造
成生長不好。
凍(dong)存(cun)方法: 凍(dong)存(cun)液:基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
儲存:液氮儲存
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