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H2EL 人胚胎成纖維細胞
培養條件:
*培養基(ji): RPMI 1640+10%胎牛(niu)血清(qing)
培養(yang)條件(jian):37.0C carbon dioxide(CO2),5%
H2EL 人胚胎成纖維細胞
傳代方法:
收到細胞后,取(qu)出培(pei)養瓶在倒(dao)置顯微鏡下觀察細胞生長(chang)情況。
(一)如果(guo)細(xi)胞未長(chang)滿,用75%酒精噴灑整(zheng)個瓶消毒后放到(dao)超(chao)菌(jun)臺內(nei),嚴格(ge)無菌(jun)操作,打(da)開(kai)細(xi)胞培養瓶,吸(xi)出(chu)培養液,僅留(liu)下(xia)10ml培養液在瓶內(nei)繼續培養。
(二)如果細(xi)胞已長(chang)滿,即(ji)可進(jin)行傳代培(pei)養。具體(ti)步驟如下:
1. 棄去培(pei)養液,用PBS(不(bu)含鈣,鎂離子)洗1-2次。
2. 加(jia)1ml消(xiao)化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,倒(dao)轉放于37度培養箱1-3分(fen)鐘預(yu)熱,然后又(you)將培養瓶倒(dao)轉大(da)(da)約30秒后,在倒(dao)置顯微鏡下觀察細(xi)(xi)(xi)胞(bao)消(xiao)化情況(kuang),若細(xi)(xi)(xi)胞(bao)大(da)(da)部分(fen)變圓(yuan)分(fen)散,輕敲(qiao)幾下培養培養瓶,細(xi)(xi)(xi)胞(bao)隨即脫落下來。
3. 加(jia)入6-8ml*培(pei)養基,吸出,分到新的培(pei)養瓶中。一傳二(er)。
注意:傳代后一半(ban)用(yong)(yong)我們的(de)培養基,一半(ban)用(yong)(yong)你們的(de),以(yi)免細胞不適應而造
成生長不好。
H2EL
凍(dong)存方(fang)法: 凍(dong)存液(ye):95%*培(pei)養液(ye),5%DMSO
儲存:液氮儲存
H2EL H2EL,
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