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HAN 人羊膜細胞
培養條件:
*培(pei)養基: RPMI 1640+10%胎牛血清(qing)
培養條(tiao)件:37.0C carbon dioxide(CO2),5%
HAN 人羊膜細胞
傳代方法:
收(shou)到細胞后,取出培養瓶在倒置顯微鏡(jing)下(xia)觀察細胞生長情(qing)況。
(一)如果細胞未長滿(man),用75%酒精(jing)噴(pen)灑整個瓶(ping)消毒后放到超(chao)菌臺內,嚴(yan)格無菌操作,打開細胞培(pei)(pei)養瓶(ping),吸出培(pei)(pei)養液(ye),僅留(liu)下(xia)10ml培(pei)(pei)養液(ye)在(zai)瓶(ping)內繼續培(pei)(pei)養。
(二(er))如果細胞已(yi)長滿(man),即可進行傳代培(pei)養。具(ju)體步(bu)驟如下(xia):
1. 棄(qi)去培(pei)養液,用PBS(不含鈣,鎂離子)洗1-2次(ci)。
2. 加1ml消化(hua)液(ye)(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于(yu)培(pei)養瓶中,倒轉(zhuan)放于(yu)37度培(pei)養箱1-3分(fen)鐘(zhong)預(yu)熱(re),然后又將培(pei)養瓶倒轉(zhuan)大(da)約30秒后,在(zai)倒置顯(xian)微鏡下(xia)觀察(cha)細(xi)胞(bao)消化(hua)情況(kuang),若細(xi)胞(bao)大(da)部分(fen)變圓分(fen)散(san),輕敲幾下(xia)培(pei)養培(pei)養瓶,細(xi)胞(bao)隨(sui)即脫落下(xia)來。
3. 加(jia)入6-8ml*培(pei)養基,吸(xi)出,分到(dao)新(xin)的培(pei)養瓶中。一傳二。
注意:傳代后一(yi)半用(yong)我們的培養基,一(yi)半用(yong)你們的,以免(mian)細(xi)胞不(bu)適應而(er)造(zao)
成生長不好。
HAN
凍存方法: 凍存液:95%*培養液,5%DMSO
儲存:液氮儲存
HAN
培養條件:
*培養基: RPMI 1640+10%胎(tai)牛血清
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